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研究背景脾虚证是胃肠道疾病的主要证型,胃肠黏膜保护是益气健脾中药的主要作用机理之一。胃肠黏膜保护是中医“脾”功能的重要内容,胃肠粘膜损伤后的修复是益气健脾中药的重要物质基础。胃肠黏膜损伤后上皮有自身修复的能力,一般最先产生的是细胞迁移,所以细胞迁移与否,是否从非损伤部位迁移至损伤部位是粘膜是否修复的关键一步。而在胃肠粘膜保护与修复的过程中,多胺及其介导的钾通道激活信号通路起重要作用。多胺增加则增强了K+通道蛋白的表达,K+外流,导致膜的超极化,促进了细胞迁移,反之消除多胺则抑制了细胞迁移。研究目的通过观察益气健脾中药甘草、党参对IEC-6(小肠上皮细胞)迁移、多胺含量及4-AP负荷下细胞迁移的影响,探讨甘草、党参胃肠黏膜损伤修复的作用机理。研究方法利用实验室已经建立的小肠上皮细胞(IEC-6)迁移药理实验模型,对受试药及促进细胞迁移工具药精脒在细胞迁移上的药效进行观察,以确定是否受试药有效。并筛选受试药的有效部位。用多胺的特异性阻滞剂DFMO、钾离子的阻滞剂4-AP来抑制细胞的迁移,再加入受试药,用来考察受试药修复胃肠粘膜损伤的作用机理。用柱前衍生高效液相色谱法检测细胞迁移过程细胞内多胺(精脒)含量。研究结果1.甘草糖提取物50、100mg/L,甘草黄酮50、100mg/L,党参糖提取物25、50、100mg/L,党参黄酮50、100mg/L,对IEC-6细胞的迁移有促进作用,而甘草糖提取物25mg/L、甘草黄酮25mg/L,甘草皂苷25、50、100mg/L,党参皂苷25、50、100mg/L对IEC-6细胞的迁移并没有作用。2.甘草糖提取物50、100、200mg/L,甘草黄酮100、200mg/L,党参糖提取物50、100、200mg/L,党参黄酮50、100、200mg/L对DFMO负荷下所致IEC-6细胞迁移的抑制有逆转作用。3.细胞给药12小时后,甘草糖提取物50、100mg/L,甘草黄酮50、100mg/L党参糖提取物100mg/L,党参黄酮100mg/L能明显提高多胺含量,细胞给药24小时后,甘草糖提取物50、100mg/L,甘草黄酮100mg/L能明显提高多胺含量。4.甘草糖提取物50、100、200mg/L,党参糖提取物50、100、200mg/L,甘草黄酮50、100、200mg/L,党参黄酮50、100、200mg/L对钾离子通道抑制剂4-AP负荷下所致的IEC-6细胞迁移抑制有逆转作用。研究结论益气健脾中药甘草和党参胃肠粘膜损伤的修复是其甘草、党参糖提取物,甘草、党参黄酮部位在起作用,并且此作用与促进损伤后肠上皮细胞的迁移有关,作用的机理可能是通过促进粘膜损伤后多胺的生成及促进了钾离子外流,进而促进细胞迁移。