1目的本临床研究拟在既往研究基础上,以外周血E₂与SDF-1α含量为切入点,研究补肾安胎冲剂的临床疗效及其对母胎界面血管生成的影响,为实验进一步研究补肾健脾中药在肾虚流产小鼠内皮祖细胞归巢机制中的作用提供理论上的支持。2方法在2019年01月至2019年12月于安徽中医药大学第一附属医院妇科门诊就诊患者中,搜集30例补肾安胎冲剂治疗肾虚证流产患者作为研究组,取就诊时及治疗2周后检测外周血SDF-1α含量、E₂含量;在同一时期的正常早期妊娠者中选择30例作为空白组,取就诊时及2周后检测外周血SDF-1α含量、E₂含量。3结果3.1两组临床一般特征情况两组患者在年龄、孕周、流产次数方面相比无统计学意义（P>0.01）。3.2研究组临床疗效研究组治疗显效12例,有效10例,无效8例;有效率73.3%。3.3两组ELISA法检测相关指标对比3.3.1 SDF-lα在外周血中含量的比较（1）首诊时:空白组外周血中SDF-lα含量高于研究组,差异有显著统计学意义（P<0.01）;（2）2周后:空白组2周后较首诊外周血中SDF-lα含量明显增多,差异有显著统计学意义（P<0.01）;研究组用药后较用药前外周血SDF-lα含量明显增多,差异有显著统计学意义（P<0.01）;研究组用药后与空白组2周后外周血SDF-lα含量无差异（P>0.01）。3.3.2 E₂在外周血中含量的比较（1）首诊时:空白组中E₂含量多于研究组,差异有显著统计学意义（P<0.01）。（2）2周后:空白组2周后较首诊外周血中E₂含量明显增多,差异有显著统计学意义（P<0.01）;研究组用药后较用药前外周血E₂含量明显增多,差异有显著统计学意义（P<0.01）;研究组用药后较空白组2周后外周血E₂含量低,差异有显著统计学意义（P<0.01）。3.3.3 E₂与SDF-lα在外周血中含量的相关性空白组、研究组外周血中E₂含量与SDF-lα含量呈正相关（P<0.01）。4结论4.1先兆流产患者较正常妊娠患者SDF-1α、E₂含量低,提示先兆流产与SDF-1α、E₂含量存在相关性;4.2外周血中SDF-1α、E₂含量呈正相关,且可能会随着孕周增长而上升;4.3补肾安胎冲剂可能通过上调SDF-1α含量纠正后期母胎界面血管生成障碍改善自然流产患者临床症状。1目的本部分实验拟在临床研究的基础上,以胚胎丢失率、EPCs数目、SDF-1α与CXCR-4含量为切入点,研究补肾安胎冲剂对流产小鼠母胎界面EPCs动员、归巢的影响及相关作用机制,进一步揭示补肾健脾中药对自然流产小鼠母胎界面血管重铸方面的意义,为临床上中药干预自然流产提供理论支持。2方法2.1建立模型2.1.1骨髓移植模型（1）造模过程:实验选择可全身性稳定表达绿色荧光蛋白的6只GFP转基因小鼠作为供体鼠,制备供体鼠骨髓单个核细胞备用。雌性ICR小鼠100只作为受体鼠,受体小鼠经X射线全身照射后,从尾静脉输注GFP标记的骨髓单个核细胞,建立骨髓移植模型。（2）造模检验:经过4周骨髓重建后取外周血检测GFP阳性细胞比例,选取BMT模型成功的小鼠,进行下一步造模。2.1.2肾虚流产模型的建立在妊娠第1天到第9天,灌服羟基脲（450mg/kg.d）进行造模。在妊娠第10天上午灌服米非司酮（4.0mg/kg.d）,以复制肾虚流产模型。2.2实验分组与给药造模成功的GFP标记的BMT肾虚流产小鼠40只,随机分为4组,每组10只,另外取GFP标记的BMT小鼠10只作为空白组。本研究中依据体表面积计算法以及补肾安胎冲剂临床应用剂量换算成小鼠给药剂量。GFP标记的BMT小鼠10只,生理盐水灌胃,作为空白组;GFP标记的BMT肾虚流产小鼠10只,生理盐水灌胃,作为模型组。GFP标记的BMT肾虚流产小鼠10只,补肾安胎冲剂（3.0g/kg.d）灌胃作为中药低剂量组;GFP标记的BMT肾虚流产小鼠10只,补肾安胎冲剂（6.0g/kg.d）灌胃,作为中药中剂量组;GFP标记的BMT肾虚流产小鼠10只,补肾安胎冲剂（12.0g/kg.d）灌胃,作为中药高剂量组。2.3取材及指标检测2.3.1骨髓采用流式细胞术检测内皮祖细胞数量。2.3.2外周血（1）采用流式细胞术检测小鼠外周血中EPCs细胞数;（2）采用ELISA法检测外周血中SDF-1α含量。2.3.3蜕膜组织（1）采用流式细胞术检测小鼠蜕膜组织中EPCs细胞数;（2）采用ELISA检测CXCR-4的表达水平。3结果3.1 GFP骨髓嵌合率的检测骨髓移植后小鼠死亡6只,造模成功50只,骨髓移植模型造模成功率为53.2%。3.2各组妊娠小鼠流产率、胚胎丢失率流产率:空白组=中药高剂量组<中药中剂量组<中药低剂量组<模型组;空白组比模型组、中药低剂量组胚胎丢失率低,差异有显著统计学意义（P<0.01）;模型组比中药高、中剂量组胚胎丢失率高,差异有显著统计学意义（P<0.01）,比中药低剂量组胚胎丢失率高,差异有统计学意义（P<0.05）;与中药高剂量组相比,中药低剂量组胚胎丢失率高,差异有统计学意义（P<0.05）;与中药低剂量组相比,中药中剂量组胚胎丢失率低,差异有统计学意义（P<0.05）。3.3各组妊娠小鼠骨髓内皮细胞数与空白组相比,模型组和中药高、中、低剂量组骨髓EPCs数量少,差异有显著统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,中药高剂量组骨髓EPCs数量多,差异有显著统计学意义（P<0.01）;与中药高剂量组相比,中药中、低剂量组骨髓EPCs数量少,差异有显著统计学意义（P<0.01）;中药低剂量组与中药中剂量组骨髓EPCs数量相比,差异无统计学意义（P>0.01）。3.4各组妊娠小鼠外周血内皮细胞数与空白组相比,模型组、中药中剂量组、中药低剂量组外周血EPCs数量少,差异有显著统计学意义（P<0.01）,中药高剂量组外周血EPCs数量少,差异有统计学意义（P<0.05）;与模型组相比,中药高、中、低剂量组外周血EPCs数量多,差异有显著统计学意义（P<0.01）;中药高、中、低组间外周血EPCs数量无统计学差异（P>0.01）。3.5各组妊娠小鼠外周血SDF-1α的含量比较空白组较模型组、中药低剂量组外周血SDF-1α的含量高,差异有显著统计学意义（P<0.01）,较中药中剂量组含量高,差异有统计学意义（P<0.05）,较中药高剂量组无明显差异（P>0.01）;模型组较中药高、中、低剂量组外周血SDF-1α的含量低,差异有显著统计学意义（P<0.01）;中药低剂量组较中药高剂量组外周血SDF-1α的含量低,差异有统计学意义（P<0.05）,较中药中剂量组外周血SDF-1α的含量低,差异有统计学意义（P<0.05）;中药中剂量组较中药高剂量组外周血SDF-1α的含量无明显差异（P>0.01）。3.6各组妊娠小鼠蜕膜组织内皮细胞数与空白组相比,模型组和中药高、中、低剂量组EPCs数量低,差异有显著统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,中药高、中剂量组EPCs数量高,差异有显著统计学意义（P<0.01）,中药低剂量组EPCs数量高,差异有统计学意义（P<0.05）;与中药高剂量组相比,中药低剂量组EPCs数量低,差异有显著统计学意义（P<0.01）,中药中剂量组EPCs数量低,差异有统计学意义（P<0.05）;与中药低剂量组相比,中药中剂量组EPCs数量高,差异有统计学意义（P<0.05）。3.7各组妊娠小鼠蜕膜组织中CXCR-4的表达与空白组相比,模型组与中药高、中、低剂量组蜕膜组织中CXCR-4含量少,差异有显著统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,中药高、中剂量组蜕膜组织中CXCR-4含量多,差异有显著统计学意义（P<0.01）,中药低剂量组蜕膜组织中CXCR-4含量多,差异有统计学意义（P<0.05）;中药高、中、低剂量组组间蜕膜组织中CXCR-4含量差异无统计学意义（P>0.01）。4结论4.1补肾安胎冲剂对小鼠流产率有影响且可降低小鼠胚胎丢失率,作用效果可能与浓度相关;4.2正常妊娠小鼠与流产小鼠相比,外周血中SDF-1α含量、蜕膜组织中CXCR-4含量高,骨髓、外周血、蜕膜组织中EPCs数量多;4.3补肾安胎冲剂可提高骨髓、外周血、蜕膜组织中EPCs数量;4.4补肾安胎冲剂可能通过上调外周血SDF-1α含量促进EPCs的动员,上调小鼠蜕膜组织CXCR-4的表达促进EPCs的归巢。