论文部分内容阅读
1.实验目的通过观察加味清肠解毒汤对TNBS/乙醇复制的溃疡性结肠炎模型大鼠的炎症细胞因子相关指标及血小板活化功能的影响来研究其治疗作用和机制。2.实验方法SPF级SD大鼠60只随机分为空白组、模型组、西药组、中药高剂量组(简称高剂量组)、中药中剂量组(简称中剂量组)、中药低剂量组(简称低剂量组),每组10只。除空白组外,其余采用TNBS/乙醇复制溃疡性结肠炎模型。第一次造模后第5周起给药,连续两周,空白组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,西药组给予美沙拉嗪缓释颗粒灌胃,中药各治疗组给予加昧清肠解毒汤水煎液灌胃。给药第7天采血检测TNF-α、TXB2、6-Keto-PGF1α含量；给药第14天采血检测TNF-α、TXB2、6-Keto-PGF1α、PC含量；给药2周后处死所有动物,分别进行结肠组织病理学评分,免疫组化法检测结肠组织IL-1β、IL-6、IL-8的表达,酶联免疫法检测结肠组织IL-10的表达,以及PCR检测结肠组织TLR4、NF-κB的基因表达。3.实验结果(1)采用TNBS/乙醇复制大鼠溃疡性结肠炎模型,造模后实验动物出现典型的腹泻、血便、体重减轻、精神萎靡等表现,经治疗后上述情况逐渐好转；与模型组比较,各治疗组体重恢复有统计学差异(P<0.01,P<0.05)；(2)与空白组比较,模型组结肠组织损伤符合典型的UC特征,病理学评分显著升高(P<0.01)；与模型组比较,各治疗组病理学评分明显下降(P<0.01,P<0.05);(3)与空白组相比,模型组大鼠结肠组织IL-1β表达明显升高(P<0.01)；与模型对照组相比,各治疗组大鼠结肠组织IL-1β表达降低,(P<0.05,P<0.01);(4)与空白组相比,模型组大鼠结肠组织IL-6表达明显升高(P<0.01)；与模型组相比,各治疗组大鼠结肠组织IL-6表达降低(P<0.05)；(5)与空白组相比,模型组大鼠结肠组织IL-8表达明显升高(P<0.01)；与模型组相比,各治疗组大鼠结肠组织IL-8表达降低(P<0.05,P<0.01)；(6)空白组不同时间点之间比较,TNF-α的表达无明显差异(P>0.05);不同时间点模型组TNF-α的表达较空白组明显增多(P<0.01)；与模型组比较,不同时间点除低剂量组之外其余治疗组的TNF-α的表达下调(P<0.01,P<0.05)；(7)与空白组相比,模型组大鼠结肠组织IL-10含量明显降低(P<0.01)；与模型组相比,各治疗组除低剂量组外IL-10的含量有所升高(P<0.05,P<0.01)；(8)与空白组比较,模型组大鼠结肠组织TLR4、NF-κB的mRNA表达增强(P<0.01)；与模型组比较,西药组和中药组大鼠结肠组织中的TLR4、NF-κB的mRNA表达下降(P<0.01)；西药组与中药组比较无显著差异(P>0.05);(9)与空白组比较,模型组大鼠PC显著升高(P<0.01)：与模型组比较,各治疗组PC有所下降,其中西药组、中药高剂量组有统计学差异(P<0.05)；(10)空白组组内不同时间点比较,血浆TXB2含量无明显差异(P>0.05)；与空白组相比,模型组不同时间点血浆TXB2含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,除低剂量组外,其余各组不同时间点血浆TXB2含量下降(P<0.01,P<0.05);(11)空白组组内各时间点比较血浆6-Keto-PGF1α含量无明显差异(P>0.05);与空白组比较,模型组不同时间点血浆6-Keto-PGF1α含量升高(P<0.05)；与模型组比较,各治疗组不同时间点血浆6-Keto-PGF1α含量升高(P<0.05,P<0.01)；(12)空白组组内不同时间点比较,TXB2/6-Keto-PGF1α比值无明显差异(P>0.05)；与空白组比较,模型组不同时间点TXB2/6-Keto-PGF1α比值显著升高(P<0.01)；与模型组比较,各治疗组不同时间点TXB,/6-Keto-PGF1α比值降低(P<0.01,P<0.05)：4.实验结论(1)加味清肠解毒汤具有改善实验性溃疡性结肠炎组织病理学评分,改善一般情况,促进实验大鼠体重恢复的作用；(2)加味清肠解毒汤降低促炎因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的过度表达,升高抗炎因子IL-10的表达,可能是其治疗TNBS/乙醇复制的大鼠溃疡性结肠炎的机制之一；(3)加味清肠解毒汤治疗实验性溃疡性结肠炎的机制可能与通过抑制TLR4、 NF-κB的过度表达继而抑制下游炎症因子的释放发挥抗炎作用有关；(4)加味清肠解毒汤治疗实验性溃疡性结肠炎的机制可能与通过下调血浆TXB2水平,上调6-Keto-PGF1α含量,降低TXB2/6-Keto-PGF1α比值,降低血小板过度活化有关。