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目的:分析T细胞受体重排删除环(T-cell receptor rearran-gement excision circles,TRECs)水平的变化,评价异体造血干细胞移植(allo-HSCT)后T细胞免疫重建的情况。
方法:收集接受allo-HSCT治疗的11名白血病患者移植前、移植之后4周内、4-8周、9-12周等不同时间点的外周血样本,临床观察移植后并发症(如移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)发生及原发病复发的情况。分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMNCs)后,采用间接免疫荧光法检测CD45RA+和CD45RO+细胞阳性率,提取DNA后采用实时定量PCR定量检测TRECs水平,结果以“TRECs拷贝数1000个PBMNCs”表示。
结果:CD45RA细胞阳性率在allo-HSCT后4周内明显低下,随后逐步上升,至allo-HSCT后9~12周又出现少许回落:而CD45RO细胞阳性率在HSCT后逐渐升高,至allo-HSCT后9~12周才出现明显降低;allo-HSCT4周内、4~8周时间段的CD45RA+细胞/CD45RO+细胞的比值与allo-HSCT前相比均有所减小,提示allo-HSCT后8周内以CD45RO+细胞的扩增为主。患者allo-HSCT前的外周血TRECs水平平均为0.8546±1.30272拷贝/1000 PBMNCs。在allo-HSCT后4周内,外周血TRECs水平稍许上升,4周后明显下降,9~12周仍平稳于较低状态。有GVHD史移植病人的外周血TRECs水平显著降低,明显低于无GVHD史移植病人的外周血TRECs水平,甚至趋于基线水平。TRECs还可能作为allo-HSCT相关的预后因子,外周血TRECs水平低下可能预示移植后的早期复发。
结论:结合T细胞亚群和TRECs等指标,对allo-HSCT后的T细胞免疫重建进行定期监测,能够更为确切地评价移植后T细胞免疫重建。