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目的：食源性致病菌污染是影响我国食品安全，引起食源性疾病、危害人民大众健康的最主要因素之一。因此，加强对食品致病菌的污染检测就显得尤为重要。本研究是以大肠杆菌O157∶H7为食源性致病菌的代表靶标物，运用化学发光磁免疫分析技术进行检测，最终建立的食源性致病菌检测方法具有高灵敏性，特异性、易操作等优点，为快速检测食源性致病菌提供了思路和技术支持。 方法：1、采用经典甲醛灭活法制备大肠杆菌O157∶H7灭活全菌抗原以消除致病性，作为抗体制备的免疫原；2、采用常规免疫法免疫雌性家兔制备大肠杆菌O157∶H7抗血清，待抗血清达到一定效价后对家兔进行颈总动脉采血，应用辛酸-硫酸铵法、Protein A亲和层析法进行多克隆抗体的初级纯化和二级纯化；3、利用抗大肠杆菌O157多抗磁珠作为捕获平台，建立以免疫磁颗粒为基础的样品前处理技术，进而实现对检测物的分离和快速富集。4、建立双抗夹心化学发光酶免疫分析法检测大肠杆菌O157∶H7，并优化检测方法及条件，验证特异性，并对脱脂牛奶及牛肉汤进行加标回收检测，运用Wilcoxon配对符号秩和检验，验证牛肉汤和脱脂牛奶中检测浓度和添加浓度有无差别。 结果：1、常规免疫后，家兔体内成功分离出抗大肠杆菌O157∶H7的血清，抗血清效价可达1∶32000，抗血清特异性良好，仅对大肠杆菌O138和大肠杆菌O139有轻微非特异性反应；2、通过辛酸-硫酸铵法、Protein A亲和层析法纯化抗血清，得到高纯度兔源性抗大肠杆菌O157∶H7多克隆抗体，多抗效价可达1∶12500；3、通过优化反应条件，最终选择37℃作为反应温度，免疫磁珠用量20μL，捕获抗体与抗原反应40min，检测抗体与抗原反应20min，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗稀释至1∶10000与检测抗体反应20min后进行化学发光检测，上机检测5min后发光值趋于稳定，标准曲线拟合优度0.968，最低检出限102~103CFU/mL，特异性良好，检测时限为2~3h，回收率在80.38%~118.51%之间。Wilcoxon配对符号秩和检验结果分析，检测牛肉汤P=0.627，P＞0.05，按α=0.05水准，不能认为该方法在牛肉汤的检测浓度和添加浓度有差别；检测脱脂牛奶P=0.597，P＞0.05，按α=0.05水准，不能认为该方法在脱脂牛奶的检测浓度和添加浓度有差别。 结论：1、常规免疫法获得了亲和力较强、特异性较高的兔源抗大肠杆菌O157∶H7多克隆抗体，建立了针对大肠杆菌O157∶H7致病菌检测抗体的制备方法；2、应用免疫磁颗粒为基础的样品前处理技术，能够快速富集食源性致病菌；3、建立了化学发光磁酶免疫分析技术，能够快速检测大肠杆菌O157∶H7，并对实际样品进行加标回收，回收值较好。