本研究对毕赤酵母工程菌所产的木聚糖酶进行浓缩透析,得到电泳纯的酶液。使用不同的化学修饰剂对其进行化学修饰研究,并研究了稳定剂对酶稳定性的影响。本研究的内容与结果如下：(1)木聚糖酶的制备：利用毕赤酵母木聚糖酶XynⅢ的工程菌进行液体发酵培养,将发酵液离心,上清酶液经过65%硫酸铵沉淀、透析纯化和浓缩,SDS-PAGE检测显示,酶液达到电泳纯。(2)木聚糖酶的化学修饰：用右旋糖酐、壳聚糖、果胶、聚乙二醇对酶进行化学修饰,对修饰后的酶液进行热稳定性和SDS-PAGE酶谱分析显示,用聚乙二醇对酶进行的化学修饰,提高了酶的热稳定性,修饰后酶的分子量也发生了变化。(3)聚乙二醇化学修饰木聚糖酶条件的优化：对修饰反应中聚乙二醇和偶联剂EDAC/NHS试剂的添加量进行了优化,最终确定了修饰反应体系中,木聚糖酶、聚乙二醇和EDAC/NHS试剂的摩尔比为1：1000：100。该修饰反应得到的修饰酶,在55℃保温10min后,残余酶活力达到61.6%,而原酶只有32.5%,60℃保温5min后,残余酶活力为30%,而原酶已完全失去活性。(4)修饰酶的酶学性质：木聚糖酶经聚乙二醇修饰后,对修饰酶的最适温度、最适pH、pH稳定性、热稳定性、底物特异性和木聚糖水解产物进行了分析,发现修饰酶只有pH稳定性、热稳定性发生了改变。(5)稳定剂对木聚糖酶热稳定性的影响：测定了木聚糖酶中添加1%右旋糖酐、1%果胶、0.2M海藻糖、0.2M蔗糖、0.2M甘露醇、0.5%甘油和0.2%苯甲酸钠对酶热稳定性的影响。结果显示海藻糖、蔗糖和甘露醇明显提高了酶的热稳定性,右旋糖酐和甘油对酶的热稳定性没有影响,添加果胶和苯甲酸钠后降低了木聚糖酶的热稳定性。