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大花蕙兰是五大重要的商业化兰花之一，具有广阔的市场前景。本研究针对目前大花蕙兰育种时间长、育种效率低的现状，以两个大花蕙兰×墨兰杂交组合的后代为材料，研究了影响大花蕙兰ISSR-PCR效果的因素，筛选与大花蕙兰香气性状连锁的ISSR标记，对组培苗形态性状与成株形态性状进行了相关和回归分析，旨在建立标记辅助大花蕙兰性状选择技术体系。主要研究结果如下：
1.建立了适合大花蕙兰的ISSR-PCR反应体系(25μl)。该反应体系中Mg2+浓度为2.0 mmol/L、dNTPs浓度为0.4 mmol/L、引物浓度为0.6μmol/L、Taq酶的用量为2U、DNA模板浓度为20 ng。
2.筛选到两个与大花蕙兰×墨兰杂交后代香气性状紧密连锁的ISSR标记b19和b21。利用ISSR标记预测杂交后代香气性状，标记b19的预测准确率为84％，标记b21的预测准确率为88％。这两个标记结合使用，预测准确率为98％。
3.发现大花蕙兰杂交后代成株株高与组培苗株高、叶长、长纵角、展叶距存在相关关系；成株叶长与组培苗株高、叶长、叶宽、叶面光滑度、展叶距存在相关关系；成株长纵角与组培苗高纵角、长纵角存在相关关系；成株叶数与根粗存在负相关关系；成株叶宽与叶宽、叶面光滑度、展叶距存在相关关系；成株叶厚与组培苗叶数、叶宽、叶厚、假球茎直径存在相关关系；成株叶面颜色与组培苗叶宽、叶厚、叶面光滑度、假球茎直径存在相关关系；成株叶面光滑度只与组培苗叶面光滑度存在相关关系；成株假球茎直径与组培苗叶宽、叶面光滑度、根长、展叶距存在相关关系；成株抗病性与组培苗叶数、叶宽存在相关关系；以上相关关系均达到显著水平。
4.建立了成株9个形态性状与相关组培苗形态性状的回归模型并获得最佳回归方程。其中成株株高(Y)对组培苗展叶距(x)、成株长纵角(Y)对组培苗高纵角(x)、成株叶厚(Y)对组培苗叶宽(x)、成株叶面光滑度(Y)对组培苗叶面光滑度(x)和成株假球茎直径(Y)对组培苗展叶距(x)的一元回归方程分别为Y=3.51+8.71x、Y=32.27+1.12x、Y=0.37+0.43x、Y=-0.11+1.15x和Y=0.97+0.42x；成株叶长(Y)对组培苗展叶距(x1)和组培苗叶面光滑度(x2)、成株叶宽(Y)对组培苗展叶距(x1)和组培苗株高(x2)、成株叶面颜色(Y)对组培苗叶面光滑度(x1)和组培苗假球茎直径(x2)以及成株抗病性(Y)对组培苗叶宽(x1)和组培苗叶数(x2)的二元回归方程分别为Y=35.85+11.85x1—19.68x2、Y=0.81+0.88x1-0.18x2、Y=-0.87+2.67x1+6.38x2和Y=1.75—6.51x1+1.43x2。上述所有方程线性显著，说明了利用组培苗的形态性状对成株形态性状进行预测是可行的。
通过上述研究，建立了ISSR标记辅助大花蕙兰香气性状选择技术体通过上述研究，建立了ISSR标记辅助大花蕙兰香气性状选择技术体系和组培苗形态标记辅助大花蕙兰成株形态性状选择技术体系。为进一步建立大花蕙兰快速高效的育种技术体系奠定了基础。