昆虫病原线虫Steinernema costaricense的生防潜力评价与其海绵存储条件优化

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luowencheng7758258
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在世界范围内化学农药市场减退并且生物农药的发展势头迅猛的背景下,多种昆虫病原体在农业害虫生物防治领域发挥着日益重要的作用。在生物农药市场上,昆虫病原细菌、昆虫病原病毒和昆虫病原真菌等三类昆虫病原体占有较大的市场份额。昆虫病原线虫(entomopathogenic nematodes,EPNs)有着上述三种广泛应用的昆虫病原体所不具有的优点,如安全性高、不易产生抗药性、对环境无害、能缓解昆虫对农药的抗性、与植物关系亲密等,但其所占的市场份额却极为有限。近年来,EPNs逐渐受到重视,投入到该类线虫应用上的研究力度也越来越大。EPNs防治害虫主要是通过其侵染期幼虫(IJs)制剂来实现。该类生防制剂商业化成功的关键在于使线虫死亡率最小化并能在其货架期维持感染性。合适的EPNs产品配方能够通过减少线虫代谢来延长货架期,并且还可以在施用前后保护线虫免受一些环境因素的毒害,从而延长其活性。不同的线虫品种对于制剂的类型、配方和存贮条件的适用情况也不同,选择适合特定品种线虫的配方和储存技术,对其防效的稳定性是非常重要的。本文通过室内生物测定方法,评估了一种近年发现但尚未对其进行应用研究的昆虫病原线虫Steinernema costaricense的生防潜力,并初步研究了能够延长这种线虫货架期的贮存剂型。现将主要研究结果总结如下。1、通过室内生物测定的方法比较了评估目标线虫S.costaricense与两种被广泛应用的线虫S.feltiae和S.carpocapsae对大蜡螟幼虫的致病力。结果表明,36 h时,S.costaricense对大蜡螟幼虫的半致死浓度为1672 IJs/ml,S.feltiae对大蜡螟幼虫的半致死浓度为1642.4 IJs/ml,S.carpocapsae对大蜡螟幼虫的半致死浓度为913.6 IJs/ml.。S.costaricense虽与S.carpocapsae的致病力相比较弱,但与S.feltiae对大蜡螟幼虫具有效果相当的致病力。2、通过室内生物测定的方法针对上述3种线虫在不同温度、湿度条件下的耐受力进行了比较。这三种线虫在4℃,10℃,20℃下均能在60 d内保持高存活率和致病性。高温处理和干燥处理的结果表明,S.feltiae处理3h后即不能存活,S.costaricense和S.carpocapsae在35℃下6h后仍能保持近50%的存活率。但高温处理后S.costaricense的致病性有显著降低,S.carpocapsae的致病性则比较稳定。S.costaricense在湿度50%RH处理6 h后,1600 IJs/ml浓度下半致死时间为38.32 h,与未处理的半致死时间38.15 h无显著差异,但在35℃下6h后致病力水平明显降低,7d内无致死情况。S.carpocapsae能在湿度50%RH下6 h后800 IJs/ml浓度下半致死时间为36.35 h,与未处理的半致死时间36.15 h无显著差异,但在35℃下6 h后半致死时间为39.73 h,致病力水平有所降低。3、从存活率和对线虫致病力影响的角度,通过对40 PPI海绵保存效果的测定,以及对保水剂、防腐剂的存储效果和洗出剂的洗出效果的测定,确定了适合S.costaricense线虫存贮的材料和浓度。海绵能够长时间贮存线虫,40 IJs/ul浓度S.costaricense线虫悬液30 d后存活率仍能维持在90%,1600 IJs/ml浓度下半致死时间为39.01 h,与对照组的半致死时间38.15 h无显著差异,能够维持致病力水平。80 IJs/ul浓度线虫悬液30 d后存活率虽然仍能维持在90%,但1600 IJs/ml浓度下半致死时间为42.54 h,与对照组的半致死时间38.15 h存在明显差异,因此确定存储浓度为40 IJs/ul较为合适。0.1%甘油溶液和0.1%甲醛溶液对线虫毒性最小,且0.1%甘油保存后,1600 IJs/ml浓度下半致死时间为38.89 h,0.1%甲醛保存后,1600 IJs/ml浓度下半致死时间为39.78 h,对线虫致病力影响最小,分别适合作为保水剂和防腐剂进行使用。同时0.05%黄原胶能够使线虫从海绵中洗出率从对照的51%提升到62%。此配方对S.carpocapsae同样适用。
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