酶解超声-表面活性剂水分分散法制备原生态杜仲精胶

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杜仲作为我国植物战略资源,植株各组织器官中不仅含有多种生物活性成分,更值得一提的是,其中富含杜仲胶,杜仲胶作为一种新型生物基橡胶,独具橡塑双重性、高弹性及记忆性功能,为杜仲资源的应用及杜仲产业开发提供广阔的前景。同时杜仲胶的提取是发展杜仲产业的关键。杜仲胶已成为我国急需大力发展的战略性新兴产业,然而杜仲胶提取技术成了限制这一新兴产业发展的勒绊。目前传统的提取技术大多存在有机溶剂消耗大、存在环境污染,生产成本较高,有安全隐患的不足,因此,研究获得污染小、成本低、效果好的杜仲胶提取工艺迫在眉睫。随着生化技术及新兴工业技术在天然产物提取应用研究的不断发展,为开拓杜仲胶提取工艺提供了重要的研究基础。基于此,为获得高纯度原生态杜仲胶丝,本文首先筛选出酶解效果好且价格便宜的工业生物酶制剂,对杜仲籽皮进行酶解预处理,有效降解杜仲植物组织中的纤维素。在酶解基础上,采用超声辅助强化提取杜仲胶,加深对植物组织结构破坏,增大杜仲胶与植物组织之间的间隙,有利于后续分离纯化制备杜仲胶。在酶解和超声强化的基础上,选用具有较好渗透、润湿作用的表面活性剂于水溶液中进行分离纯化获得原生杜仲精胶,达到降低生产成本、减少溶剂消耗、安全环保的高纯度原生杜仲胶提取目的。最后通过傅里叶红外光谱及核磁共振氢谱法分析了原生杜仲胶的分子结构。主要研究内容与结果如下:1、以去籽榨油后的杜仲籽皮为原料,采用生物酶解法对包裹在杜仲胶外层的植物组织进行降解。以酶解液中糖含量与酶解后粗胶中杜仲胶含量为指标,首先对生物酶种类及复配酶配比进行筛选,随后用实验因子设计考察了酶解温度、酶解时间、酶解p H、酶液浓度对酶解效果的影响。结果表明:复配酶的酶解效果优于单一酶,酶解工艺优化条件为:酶解温度:50℃,酶解时间:4h,酶解p H:6.0,酶浓度:4.0mg/m L。在优化条件下,酶解后粗胶原料中杜仲胶含量可达47.4±1.07%,大量的杜仲胶丝暴露在植物残渣外层,而且保持了杜仲胶丝的原生状态。2、在复合酶解杜仲植物组织的基础上,利用超声波强化破坏杜仲植物组织,研究表明超声强化辅助处理对提高杜仲粗胶纯度具有一定的效果。通过单因素试验研究了超声频率、功率、时间、温度、料液比五个因素对超声辅助处理杜仲胶提取的影响,进一步对超声频率、功率、时间、温度、料液比五个主要影响因素设计响应面优化试验,研究确定最佳工艺条件超声频率为40Khz、功率为320w、时间为7.3h、温度为50℃、料液比为1:70 g/m L,在该条件下超声处理后杜仲胶含量为64.8%,研究发现相较于复配酶处理后杜仲胶含量提高了1.4倍。因此,利用超声强化辅助处理杜仲粗胶,进一步除去了部分植物残渣,提高了粗胶中胶含量,且超声处理后残留的植物碎屑与杜仲胶丝的结合明显减弱,这为下一步高纯度原生态杜仲精胶的提取分离提供了有利的基础条件。3、研究建立超声-表面活性剂水分分散法分离纯化酶解杜仲粗胶提取原生杜仲胶的工艺。通过单因素对表面活性剂的选择、浓度、温度、时间、转速、料液比影响因素以杜仲胶的纯度作为考察指标,对原生杜仲胶的提取效果进行研究,进一步采用BBD响应面试验,建立了杜仲胶纯度与浓度、温度、时间、转速、料液比五个因素的二次回归模型,优化确定浓度、温度、时间、转速、料液比的最佳工艺参数,选用S-7为最佳表面活性剂,在浓度1.7%,温度为80℃,时间为55h,转速为1200rpm,料液比1:60最佳优化条件下杜仲胶纯度为95.4%,,通过红外光谱和核磁共振氢谱图的分析,对吸收特征峰及信号分析鉴定官能团,最终确定提取后的白色丝状固形物为原生杜仲胶。
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