桃SPL基因家族的鉴定及PrupeSPL16,17,19在果实成熟软化过程中作用的研究

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuhande
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桃(Prunus persica(L.)Batsch.)果实耐贮性差,采后极易软化腐烂成为目前桃生产中亟待解决的问题之一,阐明桃果实软化机制,找出关键调控因子,对改良桃果实耐贮性具有重要意义。SPL(SQUAMOSA promoter-binding protein like)基因在调控植物生长发育过程中起重要作用。本研究鉴定了桃SPL基因家族成员,同时分析了SPL家族成员在不同桃品种中的表达特性,此外还利用VIGS(Virus induced gene silence)与瞬时过表达技术研究关键成员PrupeSPL16、PrupeSPL17与PrupeSPL19在桃果实成熟软化中的功能及其作用机制。主要研究结果如下:1、在桃基因组中鉴定出25个PrupeSPL基因家族成员,根据染色体定位依次命名为PrupeSPL1-25,除PrupeSPL16基因缺乏Zn-2结构外,每个PrupeSPL基因都含有一个SBP保守结构域,两个锌指结构和一个核定位信号。2、桃SPL家族成员的表达表现出一定的组织特异性,PrupeSPL16,17在果实中高表达;新梢中PrupeSPL7和PrupeSPL8表达量较高;叶片中PrupeSPL14,15具有较高表达量;绝大部分PrupeSPL成员在根和花中的表达量较低,但在幼果中表达量较高,随着果实的生长发育表达量呈下降趋势,但不同品种间存在一定差异。在果实成熟软化期,PrupeSPL1,3,4,7,8,10,14,15,16,17,19均呈上调表达趋势;而其他PrupeSPL家族成员的表达量较低且稳定。乙烯处理‘秦王’果实,促进PrupeSPL10-20的表达;而乙烯处理‘浅间白桃’果实,显著促进了PrupeSPL1-9,13,19的表达,对其他PrupeSPL家族成员的表达量影响较小。3、PrupeSPL16定位于细胞核与细胞膜,而PrupeSPL17定位于细胞核。病毒诱导果实中PrupeSPL16,PrupeSPL17,PrupeSPL19基因瞬时沉默后,果实软化受到不同程度的抑制,除Pp EXP外,成熟软化相关基因的表达量均下调,且在贮藏后期下调作用更显著。果实中瞬时过表达PrupeSPL16,PrupeSPL17后,果实的凝聚性显著降低,但对果实硬度变化的影响较小,同时在贮藏前期成熟软化相关基因的表达量被显著抑制,而在贮藏后期被显著促进。4、酵母单杂实验结果显示,PrupeSPL16、PrupeSPL17蛋白均可以与Pp ACS2、Pp ACO1启动子互作,而与Pp PG2和Pp EIN1的启动子均不互作。本研究对桃PrupeSPL基因家族进行了系统的分析,为进一步研究SPL基因与其他调控果实成熟基因在桃果实发育及成熟软化过程中的功能特性奠定了重要基础。
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