【摘 要】
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目的:利用基因芯片、Northern Blot等分子生物学技术筛选、分析并鉴定青少年肾阳虚体质者外周血白细胞的差异表达基因,以从基因水平探究青少年肾阳虚体质的内在机理.方法:该
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目的:利用基因芯片、Northern Blot等分子生物学技术筛选、分析并鉴定青少年肾阳虚体质者外周血白细胞的差异表达基因,以从基因水平探究青少年肾阳虚体质的内在机理.方法:该课题包括典型研究对象的针对性调查筛选及实验研究两部分.通过针对性调查对154例16-24岁青少年进行问卷调查,筛选典型的青少年肾阳虚体质者.利用体外转录方法,将青少年肾阳虚体质组与同年龄段的正常体质组外周血白细胞mRNA,合成为标记有不同荧光Cy3及Cy5的cDNA探针,运用杂交互补原理,将探针与H80s基因芯片杂交,通过荧光信号强度的不同筛选差异表达基因;进一步运用NorthernBlot技术,鉴定部分筛选出的差异表达基因在对照组与肾阳虚体质实验组间的表达差异.结论:与青少年肾阳虚体质相关的基因表达,涉及到免疫相关、细胞周期蛋白、发育相关、细胞生长、细胞凋亡相关蛋白、原癌基因和抑癌基因、代谢、离子通道和运输蛋白、细胞骨架和运动、DNA结合、转录和转录因子、细胞受体、细胞信号和传递蛋白、蛋白翻译合成等多方面.CCNH、CXCR4基因的下调表达以及PSMB7基因的上调表达可能与青少年肾阳虚体质密切相关.首次将基因芯片技术引入中医体质研究,结果表明将基因技术用于中医研究是可行的,利用基因方法可望开拓中医体质学说研究的新思路、新方法.
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