双蝴蝶的化学成分及抗炎作用研究

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双蝴蝶为龙胆科植物双蝴蝶Tripterospermum Chinense(Miao)H.Smith的全草,又名肺形草、黄金线。双蝴蝶气微,味微苦,性甘,归肺肾经,它具有清热解毒、祛痰、止咳的功效,适用于治疗支气管炎、肺炎、肾炎等症。本论文主要研究了双蝴蝶中的乙酸乙酯和正丁醇萃取物的化学成分,使用葡聚糖凝胶、硅胶柱色谱、反相制备高效液相色谱等技术手段对其化学成分进行分离和纯化。通过MS、1D NMR、2D NMR等方法对分离得到的化合物进行结构鉴定,共得到20个化合物,其中有6个为环烯醚萜类化合物,4个酮类化合物,2个木质素类化合物,1个酰胺类生物碱类化合物以及7个其他类化合物,结合上述方法将这些化合物分别鉴定为双蝴蝶苷I(1)、双蝴蝶苷B(tripterospermumcin B)(2)、4’-m-hydroxybenzoyl loganin(3)、(7R)-7-caffeoyloxysweroside(4)、morroniside(5)、1,3,7-三羟基-4-C-β-D-葡萄糖基酮(lancerin)(6)、(-)-loliolide(7)、1,7-二羟基-3,8-二甲氧基酮(8)、1,3,8-trihydroxyxanthone(9)、1,3,5-三羟基酮(10)、4,8-dihydvoxyeudesmi(11)、(+)-pinoresinol(12)、2’-acetamido-3’-phenylpropyl 2-benzamido-3-phenyl propionate(13)、3-羟基-4-甲氧基苯甲酸甲酯(methyl 3-hydroxy-4-methoxybenzoate)(14)、咖啡酸乙酯(Caffeoyl ethyl ester)(15)、邻苯二甲酸二丁酯(16)、ethyl 4-hydroxy-3-methoxybenzoate(17)、9,12-octadecadienoic acid(z,z)-2,3-di-hydroxypropyl ester(18)、vanillic acid(19)、苯甲酸(20)。化合物1是二聚环烯醚萜类化合物且是新化合物,命名为双蝴蝶苷I。化合物3,4,9-13是首次从双蝴蝶中分离得到。针对有关炎症的8个靶点,开展了双蝴蝶中主要的化合物分子对接研究。其中双蝴蝶苷I(1)与靶蛋白JNK1、JAK1、IL-6、MIF、SIRT1结合比较好;4’-mhydroxybenzoyl loganin(2)与靶蛋白JNK1、JAK1、MIF、SIRT1结合比较好;(7R)-7-caffeoyloxysweroside(3)与靶蛋白MKK6、PPAR-γ、MIF、SIRT1结合比较好;morroniside(4)与靶蛋白MKK6结合比较好;lancerin(5)与靶蛋白JNK1、JAK1、MKK6、PPAR-γ结合比较好;1,7-二羟基-3,8-二甲氧基酮(7)与靶蛋白JAK1、PPAR-γ、MIF、ERK1;1,3,8-Trihydroxyxanthone(8)和1,3,5-三羟基酮(9)则与靶蛋白SIRT1结合比较好。另外通过Gress法检测NO的浓度的方法对双蝴蝶中的双蝴蝶苷I、4’-m-hydroxybenzoyl loganin、(7R)-7-caffeoyloxysweroside、morroniside、lancerin、1,7-二羟基-3,8-二甲氧基酮、1,3,8-trihydroxyxanthone、1,3,5-trihydroxyxanthone进行体外抗炎作用实验,结果发现化合物双蝴蝶苷I(1),(7R)-7-caffeoyloxysweroside(3),1,3,8-Trihydroxyxanthone(7)对NO的释放有一定的抑制作用。
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