【摘 要】
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乳酸菌是一种益生菌,并广泛应用在食品发酵工业中,其代谢产物——乳酸菌素具有抑菌作用,被人们公认为是安全、高效、可靠的食品防腐剂。近年来,随着抗生素滥用和防腐剂危害的加剧
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乳酸菌是一种益生菌,并广泛应用在食品发酵工业中,其代谢产物——乳酸菌素具有抑菌作用,被人们公认为是安全、高效、可靠的食品防腐剂。近年来,随着抗生素滥用和防腐剂危害的加剧,更安全绿色的防腐剂越来越受到人们的青睐。乳酸菌素由于具有良好的抑菌性和安全性而受到了越来越多的关注。同时,由于乳酸菌素具有高效、安全无毒、无残留、无抗药性等无可比拟的优点,也被认为是抗生素的最理想的替代物。本试验以四川成都小米椒泡椒、红原牦牛酸奶和牦牛肠粘膜三个来源的乳酸菌为研究对象,利用MRS选择培养基筛选出具有抑菌活性的乳酸菌,并对其进行了初步的研究,主要内容有:(1)通过形态学观察、常规生理生化特征分析和16S rRNA分子鉴定,分离鉴定出来的菌株有5株乳酸粪肠球菌(B13、B17、B20、C5和C12)、4株乳球菌(G1、G2、G4和G5)和1株乳杆菌(G3)。(2)对筛选出来的10株乳酸菌所产生的细菌素进行抑菌试验,发现其不仅可以抑制革兰氏阳性菌(如枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌),而且也能抑制革兰氏阴性菌(如大肠杆菌、志贺氏菌和沙门氏菌);乳酸菌素效价较高,最高为17.47×105IU/mL;对胰蛋白酶和蛋白酶K敏感,对胃蛋白酶不敏感;对热、酸稳定。经单因素条件优化后确定产细菌素的最适条件为接种量为4%,培养温度为34℃,起始pH为6。(3)克隆三个与乳酸菌素相关的基因(sppK、JSA和JSB),结果表明,克隆的sppK序列与NCBI上已发表的sppK序列相似性为100%;克隆的JSA的序列与NCBI上已发表的JSA序列的相似性为91%;克隆的JSB序列与NCBI上已发表的JSB序列的相似性为93%,通过阅读框1翻译出来的蛋白质为疏水性蛋白,包含Alpha helix和Random coil。
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