【摘 要】
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疱疹病毒是二十面体对称的双链DNA病毒,属于疱疹病毒科。迄今已发现的能感染人的疱疹病毒主要有带状疱疹病毒和单纯疱疹病毒等。单纯疱疹病毒（HSV）感染现已成为世界上第四大传染病。据统计有70%～90%的成年人曾感染过HSV-1。HSV-1最初的感染部位一般是口腔黏膜或者其他相关区域的上皮细胞,并在这些部位发生裂解感染。随后,病毒会沿着神经元轴突传递到宿主的三叉神经节等神经组织中,产生终生性的潜伏感染
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疱疹病毒是二十面体对称的双链DNA病毒,属于疱疹病毒科。迄今已发现的能感染人的疱疹病毒主要有带状疱疹病毒和单纯疱疹病毒等。单纯疱疹病毒（HSV）感染现已成为世界上第四大传染病。据统计有70%～90%的成年人曾感染过HSV-1。HSV-1最初的感染部位一般是口腔黏膜或者其他相关区域的上皮细胞,并在这些部位发生裂解感染。随后,病毒会沿着神经元轴突传递到宿主的三叉神经节等神经组织中,产生终生性的潜伏感染,还会伴随周期性的重激活。而一旦被重激活会导致患者产生疱疹病毒性角膜炎、疱疹病毒性脑炎及口唇疱疹等疾病。目前,国内外医疗机构针对HSV-1感染的主要治疗手段是药物,而针对HSV-1疫苗研究较少。本实验室前期已经成功采用酵母表面展示技术制备了酵母口服疫苗X-33-PDI-g D,发现该疫苗可以有效地诱导小鼠产生相应的免疫应答。为了进一步探究该疫苗在小鼠暴露于HSV-1的有效性,本研究深入探究了在疫苗接种后,动物的免疫保护性和相关评估实验。本研究以BALB/c小鼠为模型进行口服疫苗接种实验。按照攻毒方式的不同,实验分为两组:第一组小鼠进行口服免疫5周,免疫结束两周后,对该组小鼠以1×106 PFU直接腹腔注射进行病毒攻击,并对小鼠体重、生存率、特异性Ig G以及特异性Ig A等指标进行检测,结果显示疫苗无法对小鼠提供完全保护。第二组小鼠口服免疫9周,免疫结束两周后,对该组小鼠以1×104 PFU进行角膜划痕感染病毒。病毒攻击初期小鼠体重出现明显的下降,当攻击病毒处于潜伏期时小鼠体重状态趋于平稳。我们利用酶联免疫吸附测定检测了小鼠血清中特异性Ig G抗体水平及小鼠粪便中特异性Ig A抗体水平,结果显示实验组Ig G指标显著高于对照组,这表明疫苗诱导小鼠机体产生了体液免疫应答。而实验组小鼠体内产生的特异性Ig A水平显著高于对照组,证明本疫苗诱导小鼠机体产生了黏膜免疫应答。此外,对小鼠小肠冷冻切片后进行免疫荧光实验,结果表明实验组的绿色荧光强于对照组,说明本疫苗靶向小肠上皮微褶细胞,并将抗原蛋白递送至肠内组织产生黏膜免疫。本研究将服用疫苗的小鼠暴露于单纯疱疹病毒,通过实时监测本疫苗对小鼠的保护效果,初步评估了本疫苗保护性,为后续对疫苗的改进实验奠定了基础。本研究的结果也将为其他酵母表面展示口服疫苗的构建提供重要的信息。
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