异叶天南星氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞的凋亡作用及其机制研究

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目的探讨异叶天南星氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞的凋亡作用及其作用机制。方法用人肝癌HepG-2细胞作为实验对象,采用MTT法测定异叶天南星氯仿萃取物对HepG-2细胞增殖的影响;HE染色法观察异叶天南星氯仿萃取物对HepG-2细胞引起的形态学变化;DNA ladder法观察异叶天南星氯仿萃取物对HepG-2细胞DNA片段的影响;Western Blotting法检测异叶天南星氯仿萃取物对HepG-2细胞P53、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响。结果MTT结果表明,异叶天南星氯仿萃取物可以抑制HepG-2细胞的增殖,其抑制作用随着给药时间的延长和药物浓度的增加而明显增强,当药物浓度为100μg/ml,作用时间为48h时,对HepG-2细胞的抑制率为54.33%,接近半数抑制浓度(IC50);HE染色结果表明,给药后的HepG-2细胞与对照组比较表现出细胞间距增大、细胞核固缩、染色变深、细胞浓缩、细胞碎裂、形成凋亡小体等一系列凋亡形态,凋亡程度随着剂量和时间的增加而增强;DNA ladder法检测结果表明,与对照组相比,异叶天南星氯仿萃取物各剂量组作用48h时HepG-2细胞DNA均降解成DNA片段,为典型的凋亡形态;Western Blotting法测定结果表明凋亡相关基因P53、Caspase-3、Bax及Bcl-2蛋白表达均有显著性改变。其中Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.01), P53、Bax、Caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论异叶天南星氯仿萃取物可以诱导肝癌HepG-2细胞凋亡,凋亡作用具有量效和时效的关系,其机制与Bcl-2表达下降及P53、Bax、Caspase-3表达升高有关。
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