目的:观察夏枯草硫酸多糖（Prunella vulgaris sulfated polysaccharide,PVSP）对TGF-β₁（transforming growth factorβ1,TGF-β1）诱导活化的大鼠肝星状T6细胞（HSC-T6）的作用,同时探索PVSP四氯化碳（carbon tetrachaloride,CCl₄）所致大鼠肝纤维化的作用,并探讨其部分相关机制。方法:体外培养HSC-T6细胞,用不同浓度的PVSP（50、100、200μg/ml）作用于TGF-β₁（transforming growth factorβ1,TGF-β1）诱导活化的HSC-T6细胞,采用细胞增殖与活性法（CCK8）测定PVSP对HSC-T6细胞增殖的影响;采用荧光定量PCR（RT-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测HSC-T6细胞中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和I型胶原（Col-I）mRNA和蛋白的相对表达量。采用40%CCl₄-橄榄油溶液腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,将大鼠随机分为5组,分别为正常对照组、秋水仙碱阳性对照组（0.25 mg/kg）、PVSP高剂量组（300 mg/kg）和PVSP低剂量组（100 mg/kg）和模型组。酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法分别测定各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、透明质酸（hyaluronic acid,HA）、层黏连蛋白（laminin,LN）、III型前胶原（procollagen-III-peptide,PC-III）、IV胶原（type IV collagen,C-IV）的含量;采用苏木素-伊红（hematoxylin and eosin,HE）及天狼猩红染色观察大鼠肝组织病理学改变。此外,采用RT-PCR和免疫组织化学法检测大鼠肝组织中α-SMA、Col-I和TGF-β₁ mRNA及蛋白的表达,并采用Western blot检测大鼠肝组织中Smad3、Smad2/3和Smad7蛋白的表达。结果:细胞实验显示,PVSP可抑制TGF-β₁诱导的HSC-T6细胞的增殖（P<0.05）;与TGF-β组相比,PVSP可减少HSC-T6细胞α-SMA和Col-I mRNA和蛋白的相对表达量（P<0.05或P<0.01）。体内动物实验显示,模型组大鼠血清中ALT、AST、HA、LN、PC-III和C-IV的含量均显著高于正常组（P<0.05或P<0.01）;与模型组比较,PVSP组大鼠血清ALT、AST、HA、LN、PC-III和C-IV的含量显著降低（P<0.05）,且高剂量作用比较明显（P<0.05）。病理学结果显示,PVSP可减轻大鼠肝脏组织胶原沉积及减轻大鼠肝纤维化程度。模型组大鼠肝组织α-SMA、Col-I和TGF-β₁ mRNA及蛋白的表达高于正常组（P<0.05或P<0.01）;与模型组相比,PVSP组α-SMA、Col-I和TGF-β₁ mRNA及蛋白明显低于模型组（P<0.05）,且高剂量组作用明显（P<0.05）。模型组大鼠肝组织中Smad3和Smad2/3蛋白表达显著高于正常组（P<0.05或P<0.01）,而Smad7蛋白表达显著低于正常组（P<0.05）;与模型组相比,PVSP组大鼠肝组织中Smad3和Smad2/3明显增加（P<0.05）,Smad7蛋白表达减少（P<0.05）,且高剂量作用比较明显（P<0.05）。结论:PVSP可抑制TGF-β₁诱导的大鼠肝星状细胞的活化;并对CCl₄所致的大鼠肝纤维化有保护作用,其作用机制可能通过调控TGF-β₁/Smads信号通路,从而抑制HSC增殖与活化,减少ECM生成及促进其降解,最终起到抗纤维化的作用。本研究为PVSP应用于临床提供了理论基础,并鼓励进一步的基础实验及临床实验来开发治疗肝纤维化的新药。