目的:间皮素(Mesothelin,MSLN)是相对分子质量约为40KDa的细胞表面糖蛋白,是新发现的肿瘤细胞表面抗原。通常只在体腔表面的间皮细胞表达,而在间皮瘤、卵巢癌、胰腺癌等恶性肿瘤中高表达。它有三个异构体,其中一个异构体可以从细胞表面脱落形成可溶性间皮素相关肽(soluble mesothelin related peptides/proteins, SMRP)释放入血,相对分子质量为42KDa～45KDa。可以从血清中检测到。本实验应用ELISA方法检测卵巢肿瘤患者及健康体检者血清间皮素水平,免疫组织化学法检测卵巢肿瘤患者手术切除标本中间皮素表达,结合临床资料回顾分析,探讨血清间皮素在卵巢肿瘤尤其是卵巢上皮性癌(epithelial ovarian cancer, EOC)的早期诊断及病情监测中的意义。本实验对卵巢癌、卵巢良性肿瘤及健康体检者三组血清间皮素水平进行观察对比,同时对卵巢癌患者不同病理类型、不同临床分期、不同病理分级血清间皮素水平进行对比分析。对接受肿瘤细胞减灭术的卵巢癌患者术前术后血清间皮素水平进行对比分析。同时检测同源血清标本中CA125的水平,与血清间皮素水平进行比较及相关性分析,对间皮素作为卵巢癌诊断血清肿瘤标志物做诊断效能评价。对血清间皮素水平能否作为临床卵巢上皮性癌早期诊断、恶性程度判断及病情监测的肿瘤标志物进行初步探讨。方法:选择2008年03月至2009年04月白求恩国际和平医院妇科及河北医科大学第四医院妇科住院手术的卵巢上皮性癌初治患者56例,卵巢良性肿瘤患者38例,健康体检中心健康女性体检者34例。选取相应卵巢上皮性癌及卵巢良性肿瘤患者手术切除组织病理存档蜡块待用。无菌抽取患者、健康女性空腹外周血3～4mL(促凝剂真空采血管)。静置待充分凝固, 12小时内离心,4℃,3000r/min,15min,取上清液-20℃以下保存待测。1免疫组织化学法检测上述卵巢肿瘤患者组织标本(病理科存档蜡块)中间皮素的表达水平,行人工半定量分析。2采用瑞典康乃格(ConAg)公司生产的MESOMARK试剂盒,应用双抗夹心ELISA法检测血清中间皮素含量。3各组血清CA125浓度均由核医学科常规测得(化学发光法)。4统计学方法:应用SPSS13.0统计学分析软件进行统计学处理,分别进行组间计量资料比较、组间计数资料比较、诊断效能评价分析、相关性分析。双侧检验P<0.05认为有统计学意义。结果:1血清间皮素检测结果:1.1卵巢癌组(组1)、卵巢良性肿瘤组(组2)、健康体检者组(组3)组间比较:组1外周血清间皮素水平明显高于组2 (Wilcoxon秩和检验统计量z=6.973,P<0.001)及组3 (z=7.153,P<0.001),差异有统计学意义。组2与组3血清间皮素水平接近,其差异无统计学意义(z=1.895,P=0.058>0.05)。1.2卵巢癌组不同病理类型间血清间皮素水平比较:浆液性癌组、粘液性癌组、子宫内膜样癌组外周血清间皮素水平比较采用多样本秩和检验, K-W检定方法(Kruskal-Wallis H Test) ,χ~2=5.736,P=0.057>0.05,其差异无统计学意义。1.3卵巢癌组不同手术-病理分期血清间皮素水平比较:分期依据FIGO(2000)制定的卵巢恶性肿瘤临床手术病理分期标准。卵巢癌Ⅱ-Ⅳ期组血清间皮素水平显著高于Ⅰ期组(Wilcoxon秩和检验统计量z=3.184,P=0.001<0.05) ,差异有统计学意义。1.4卵巢癌组不同分化等级间血清间皮素水平比较:分化等级G1级(高分化)、G2级(中分化)、G3级(低分化)三组血清间皮素水平差异有统计学意义,K-W检定方法,χ~2=26.221,P=0.000<0.05,分化越低,血清间皮素含量越高。1.5卵巢良性肿瘤组不同病理类型间血清间皮素水平采用多样本秩和检验,K-W检定方法,χ~2=6.948,P=0.225>0.05,其差异无统计学意义,尚不能认为卵巢良性肿瘤六种不同病理类型组间的血清间皮素水平分布有差异。1.6卵巢癌术前术后血清间皮素比较:56例卵巢癌中的23例接受了肿瘤细胞减灭术的患者,术后1周血清间皮素较术前降低,采用独立样本秩和检验,z=5.129,P=0.000<0.05,差异有统计学意义。2血清间皮素水平对卵巢肿瘤的诊断价值:SPSS13.0统计软件ROC曲线分析显示其诊断正确度较高。(以术后病理诊断为诊断金标准,卵巢癌组56例为病例组,其余卵巢良性肿瘤38例和健康志愿者34例合计72例为对照组)ROC曲线下面积(area under the ROC curve,AUC)为0.938,标准误为0.026,其95%的近似置信参考区间为(0.888～0.988)。3应用ELISA法检测血清间皮素作为血清标志物以区分卵巢癌与卵巢良性肿瘤及健康女性,其诊断效能评价:确定截断值cut-off=1.6432nM,获得血清间皮素结果的诊断标准如下:当血清间皮素≥1.6432nM时被诊断为阳性,即异常;当血清间皮素<1.6432nM时被诊断为阴性,即正常。此时敏感性(sensitivity)=0.821,特异性(specificity)=1。4血清间皮素与CA125对卵巢肿瘤患者诊断价值的比较(以术后病理诊断为诊断金标准,卵巢癌组56为病例组,38例卵巢良性肿瘤为对照组。血清间皮素≥1.6432nM诊断为阳性;<1.6432nM为阴性。血清CA125≥35.0u/ml诊断为阳性;<35.0u/ml为阴性)。间皮素ROC曲线AUC为0.925,CA125ROC曲线AUC为0.941。二者诊断正确度均较高。血清间皮素检测特异度(Sp)、漏诊率(β)、阳性预测值(PV+)、正确率(π)、Youden指数(YI)较CA125高;灵敏度(Se)稍低接近;误诊率(α)低,阴性预测值(PV-)稍低。5血清间皮素水平与血清CA125水平相关性分析:应用Spearman秩相关分析,p=0.334>0.05,表明血清间皮素与CA125水平无相关关系。6对卵巢癌患者血清间皮素水平与患者术前腹水量、原发肿瘤体积、绝经情况分别进行相关性分析,采用Spearman等级相关分析,结果显示血清间皮素水平与上述三种因素均无明显相关性。7联合血清间皮素与CA125进行平行诊断试验分析,联合敏感度为97.9%,联合特异度为81.6%,与单独应用血清间皮素或CA125相比,敏感性提高。8间皮素在卵巢上皮性癌组织中有不同程度表达。卵巢癌患者组织间皮素表达程度与血清间皮素水平间无明显相关性,Spearman相关系数为0.462,p=0.178>0.05。结论:1卵巢癌患者血清中间皮素水平:应用ELISA双抗体夹心法测定,卵巢癌患者血清中间皮素水平明显高于卵巢良性肿瘤患者及健康女性。卵巢癌患者血清间皮素水平与卵巢癌临床病理分期、分化程度有关。2血清间皮素诊断卵巢癌有较高的特异性及敏感性,对卵巢癌与卵巢良性肿瘤鉴别诊断的特异性较CA125高,临床诊断效能较好。有望成为卵巢癌血清肿瘤标志物用于临床检测以助提高卵巢癌的早诊率。3接受了理想的肿瘤细胞减灭术的卵巢癌患者术后血清间皮素较术前显著降低。血清间皮素作为卵巢癌治疗效果评价、病情监测指标也具有可行性。