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聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）作为一种经典的分离分析技术，因为其成熟的操作，很好的分离效果，商业化的电泳装置，已经在生农化医等实验室被广泛的应用于蛋白质、DNA、纳米粒子等物质的分离分析中。从19世纪60年代提出该方法以来，PAGE在其应用范围和方法的灵敏度提高方面得到了很大的发展，但仍然有两点有待发展，一是PAGE分离的原理多是基于等速电泳的原理（不像毛细管电泳已经发展出超过十种分离模式）；二是经典的PAGE上样量一般不高于15l，上样量大则分辨率变差。近年来，移动反应界面（movingreaction boundary，MRB）理论发展很迅速，尤其是移动中和界面（movingneutralization boundary， MNB）已用于化学分析中包括等电聚焦（isoelectric focusing，IEF）、酸碱滴定等基础研究和两性电解质和小分子药物的富集应用研究。本文将移动反应界面的原理应用到PAGE中解决了存在的两个问题，以血红蛋白为模式蛋白，对其成功的进行了分离和富集，使灵敏度达到了至少8倍的提高。本论文的综述部分包括三个部分。1.聚丙烯酰胺凝胶电泳的基础理论及其发展应用。2.移动反应界面原理的发展，分类和应用。3.血红蛋白的种类和性质，与临床诊断相关的两种蛋白的研究意义和常用的分析方法。实验分为两个部分，首先是建立分离血红蛋白的MRB-PAGE模型，然后是通过等电聚焦，MALDI-TOF MS对MRB-PAGE分离得到的血红蛋白条带进行鉴定。在本课题的第一部分，我们根据已有的商业化的垂直电泳装置构建了MRB-PAGE分离大体积低丰度蛋白的理论模型，根据模型优化了胶浓度，交联度，三种关键缓冲液的浓度和pH值等参数。在第二部分中，使用优化好的体系进行了模式蛋白血红蛋白的分离，与包括经典PAGE在内的三种分离模式进行了比较，灵敏度至少提高了8倍，并结合IEF，MS等技术对所分离的血红蛋白条带进行了鉴定，得到了较为满意的结果。以上两部分实验证明MRB-PAGE运用到低丰度大体积蛋白样品的的分析中，可以有效的提高分析灵敏度和提高分辨率。因此，本课题的研究对稀释蛋白的分离分析和平板聚丙烯酰胺凝胶电泳富集的基础理论研究等方面都具有重要意义。