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本研究以有机磷杀虫剂毒死蜱作为研究对象,采用微生物的富集分离法筛选毒死蜱的高效降解细菌,最终选定XZ-3菌株作为研究对象,并对该菌株进行了形态学、生理生化及16S rDNA鉴定,对降解微生物的富集分离,环境条件对XZ-3菌株降解能力的影响以及该菌降解酶的降解特性等方面进行了系统的讨论,同时研究了土壤中蚯蚓对毒死蜱的降解效果以及毒死蜱对蚯蚓生理指标的影响,主要研究内容如下:1.介绍了毒死蜱的理化性质、国内外应用概况,以及由于其应用所带来的环境污染问题;在对前人工作总结分析的基础上,对毒死蜱在环境介质中的残留动态、降解代谢、生态毒理及微生物降解进行了综述;研究了蚯蚓对土壤中毒死蜱的降解效果;进而提出了作者要研究的问题。2.通过富集培养法和直接培养法筛选出数株毒死蜱的高效降解菌,同时研究实验室筛选出的其他降解菌对毒死蜱的降解效果,最终获得三株毒死蜱的高效降解细菌:XZ-3、XZ-4、QZ-11,三株菌在30℃、pH 7.0,48h内对50mg?L-1的毒死蜱均达到70%以上,其中以XZ-3对毒死蜱的降解率最高,经过对其形态、生理生化特征及16S rDNA的分析,鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.),最终选定毒死蜱高效降解细菌XZ-3作为下一步深入研究的菌株。3.测定了不同碳源、pH、温度及毒死蜱浓度对细菌降解能力和生长量的影响。结果表明,该菌株24h内对100mg?L-1毒死蜱的降解率高达86.8%;在外加碳源浓度为0.3%时降解率最大;细菌的生长量随着外加碳源浓度的升高而增加;pH在偏酸和偏碱性的条件下降解率较大,pH 9.0时达到最大,细菌的生长量在pH 8.0~10.0偏碱性的条件下较大;在毒死蜱浓度为100mg?L-1时降解率最大;该菌具有较强的抗药性,当毒死蜱浓度达到1000mg?L-1时仍能生长,细菌的生长量在800mg?L-1时达到最大,绝对去除量随毒死蜱浓度的提高而增加;细菌的生长和降解需要适宜的温度,30℃培养时,降解率和生长量最大。4.从高效降解细菌XZ-3中提取了降解酶,初步研究了该降解酶的分离条件及对毒死蜱的降解特性。研究表明,其胞内酶对毒死蜱的降解率高达50.5%,细胞碎片对毒死蜱的降解率为34.9%,胞外酶液对毒死蜱的降解率为24.2%,经几次非诱导条件下培养提取粗酶液,酶活力损失较少,判断XZ-3菌株的毒死蜱降解酶为胞内酶且属于组成酶。以牛血清白蛋白为标准蛋白测得粗提酶中可溶性蛋白的含量为1.894mg?mL-1;该酶对毒死蜱的酶促降解最适pH为9.0;最适温度为30℃,在实验温度范围20~40℃内该降解酶均具有较好的降解活性。测得粗提酶中其米氏常数Km为0.8633mmol?L-1,Vmax为0.2411μmol? (mg?min)-1;该酶具有较好的热稳定性和pH稳定性,对热和pH均具有较好的耐受力。5.设置两个处理,一个处理是加药不加蚯蚓(赤子爱胜蚯蚓Eisenia foetida)的CK,另一个处理是向含农药毒死蜱的土壤中加入蚯蚓,研究土壤中加入蚯蚓对毒死蜱的降解效果同时考察毒死蜱对蚯蚓生理指标的影响。通过研究土壤中添加毒死蜱前后蚯蚓体重的变化得出,除了第10d的蚯蚓总体重大于第0d外,整体来说,蚯蚓的总体重是随着时间的增加而减少的。另一方面,随着时间的增加,由于蚯蚓的作用使得土壤中毒死蜱的降解率升高,说明通过在土壤中加入典型动物蚯蚓可以对毒死蜱的降解起到一定的促进作用。