雀嘴茶药学基础研究

来源 :昆明医学院 昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lcsuoboger
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【目的】1、测定雀嘴茶Lyonia ovalifolia(W.)Drude的半数致死量及其对小白鼠毒理学、病理学的初步研究。2、提取分离雀嘴茶Lyonia ovalifolia(W.)Drude中的化合物并鉴定分析结构。3、探讨雀嘴茶Lyonia ovalifolia(W.)Drude、何首乌Polygonum multiflorum Thunb、迷迭香Rosemarinus officinalis L.、云南山楂C pinnatifida Bge.、地参Lycopus Lucidus、红雪茶Thamnoiaver-micularis(Ach.)Asahina、灯盏花Breviscapine七种植物及其提取物对四氧嘧啶致糖尿病模型小鼠血糖的影响。【方法】1、50只小鼠雌雄各半,随机分为5组,以一定浓度不同体积的提取物给小鼠灌胃给药,连续观察小鼠行为活动、状态、毒性反应程度及死亡情况等指标,并及时对小白鼠进行病理学观察,以获得LD50、病理学资料。2、用乙醇对雀嘴茶Lyonia ovalifolia(W.)Drude进行提取,所得浸膏用水稀释后,石油醚萃取多次,直至石油醚无色,水层再用乙酸乙酯多次萃取,合并乙酸乙酯相,减压回收乙酸乙酯后得浸膏,对浸膏进行硅胶柱(200~300目)色谱分离,甲醇-氯仿体系梯度洗脱。运用理化方法及现代波谱分析技术(MS,1HNMR,13CNMR,)鉴定所得化合物。3、将ICR种健康雄性小鼠,体重为24~27g,随机分组,A组为空白对照组,喂饲基础饲料。另外小鼠饲以基础饲料适应性喂养3天后,尾静脉注射60mg.kg-1的四氧嘧啶生理盐水溶液,造成胰腺损伤建成糖尿病模型小鼠。选取血糖值大于11.1mmol.L-1的小鼠作为本次实验糖尿病模型小鼠。将选出的小鼠按血糖值和体重再随机分为8组,B组(阴性对照组),C组(红雪茶干预组)、D组(地参干预组)、E组(迷迭香干预组)、F组(灯盏花干预组)、G组(何首乌干预组)、H组(雀嘴茶干预组)、I组(云南山楂干预组)每组6只。给C、D、E、F、G、H、I组小鼠给予适当的提取物混悬溶液等体积灌胃,每天两次,连续给药两周,同时A组和B组小鼠用蒸馏水灌胃,为期两周,每周自尾静脉取血测定血糖值。把上述实验数据进行统计分析,发现迷迭香Rosemarinusofficinalis、雀嘴茶Lyonia ovalifolia(W.)Drude、何首乌Polygonummultiflorum Thunb可能会有一定的调节血糖的作用(p<0.05或者接近0.05)。4、在此预试验的基础上以同样的方法分组(组号为1、2、、、),扩大小鼠数量、加宽给药剂量范围,进行下一轮对迷迭香Rosemarinus officinalis、雀嘴茶Lyoniaovalifolia(W.)Drude、何首乌Polygonum multiflorum Thunb、的筛选。【结果】1、雀嘴茶Lyonia ovalifolia(W.)Drude显示出一定的毒性反应,其半数致死量LD50为39.9g/kg,且通过病理学的初步研究发现雀嘴茶Lyoniaovalifolia(W.)Drude对胃肠道、肝、肾等小鼠的重要器官均有一定的损害。2、从乙酸乙酯部分分离得到两个化合物,分别鉴定结构,化合物1为对苯二酚,化合物2为对羟苯基-6-O-反-咖啡酰-β-D-葡萄糖苷。两个化合物系首次从雀嘴茶Lyonia ovalifolia(W.)DrudeLyonia ovalifolia(W.)Drude中得到。3、所有指标以(?)±S表示,用spss 12.0软件进行分析,检验水准a=0.05或者a=0.01。其余各组与B组阴性相比,迷迭香Rosemarinus officinalis、雀嘴茶Lyoniaovalifolia(W.)Drude P<0.01,其余各组无统计学意义。4、对雀嘴茶Lyonia ovalifolia(W.)Drude、何首乌Rosemarinus officinalis、迷迭香Rosemarinus officinalis三个品种进行复筛,各组与2组(阴性组)相比,一周后何首乌高、低剂量组,迷迭香高、低剂量组,雀嘴茶高、低地剂量组有降血糖作用,统计学分析有显著性意义(p<0.01或p<0.05),但达不到正常血糖值。两周后何首乌高、低剂量组,迷迭香高、低剂量组有明显的降血糖作用,统计学分析有显著性意义,(p<0.01),但也达不到正常血糖值。雀嘴茶高、低剂量组无降血糖作用,统计学分析无显著性差异,p>0.05。【结论】1、实验测定雀嘴茶Lyonia ovalifolia(W.)Drude醇提取物LD50为39.9 g/kg,说明市售用于保健作用的雀嘴茶Lyonia ovalifolia(W.)Drude有一定的毒性损害,病理学初步研究也表明其对胃肠道、心、肝、脑等小鼠的多个重要脏器都有不同程度的病理损伤,长期使用可能会对人体造成一定的危害,应该慎重使用,甚至是禁止使用。2、化合物1,2为首次从雀嘴茶Lyoniaovalifolia(W.)Drude里提取分离得到,雀嘴茶Lyonia ovalifolia(W.)Drude中对羟苯基-6-O-反-咖啡酰-β-D-葡萄糖苷的含量较高。3、何首乌Rosemarinusofficinalis、迷迭香Rosemarinus officinalis、雀嘴茶Lyonia ovalifolia(W.)Drude三个物质均有不同程度的降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠的血糖值。
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