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目的肺癌是全世界最常见的恶性肿瘤,死亡率居全癌首位。全球每年平均新发男性病例109.50万,死亡95.10万,女性新发病例51.36万,死亡42.74万人。男性肺癌的发病率呈现下降趋势的同时,女性肺癌的发病呈上升趋势。女性非吸烟者肺癌不仅仅在发病率死亡率等流行病学分布特征有别于男性吸烟者肺癌,在临床病理特征、分子标志物、治疗反应以及预后因素等方面也具有其相对独特的表现。东亚女性非吸烟者肺癌呈现EGFR高突变率的现状,但相关机制不清。miRNA因其对肿瘤发生发展的调控作用备受关注,miRNA可能在EGFR通路中发挥调节作用,加之组织、血浆miRNA表达谱的一致性鲜有报道。本研究利用国际上先进的TaqMan低密度芯片检测组织、血浆中miRNA的表达谱,筛选差异表达的miRNA后,进行大规模人群验证,分析组织、血浆miRNA表达的一致性,探讨miRNA与EGFR突变的相关性及其与临床转移预后,女性生理生育因素的相互作用。方法本研究采用分子流行病学研究方法,对130例组织、血浆匹配的女性非吸烟肺癌患者进行传统流行病学问卷调查,随后采用DNA测序技术检测EGFR基因18-21外显子的突变情况。TaqMan低密度芯片的方法用于筛选血浆及组织差异表达的miRNA,通过分析前期文献报道的肺癌EGFR调节的miRNA及生物信息学数据库预测选取4个miRNA指标,在血浆和组织样本中采用qRT-PCR方法,检测miRNA的表达谱,分析血浆和组织miRNA的表达的一致性及其与EGFR突变、与临床转移突变和与女性生理生育因素的相互作用。结果(1)本研究女性非吸烟肺腺癌患者组织、血浆miRNA的表达不具有一致性,miR-155、miR-25、miR-16 和 miR-133a 的 Spearman 秩相关性分析 P 值分别为0.6637,0.5299,0.1361 和 0.3413。(2)本研究女性非吸烟肺腺癌的EGFR突变率为54.62%。初潮年龄大的患者不容易发生 EGFR 突变(OR=0.376,95%CI=0.146-0.970)。组织 miR-25、miR-133a表达与EGFR突变相关(P=0.0005,0.0454),在突变型中表达上调。临床分期晚期(Ⅲ/Ⅳ期)的分层中,EGFR突变型和野生型miR-16的表达存在差异,突变型中miR-16的表达明显下调(P=0.0005)。(3)血浆miR-16的表达在绝经晚的女性非吸烟肺腺癌患者中的表达较绝经早者上调(P=0.0294)。miR-133a的表达在不同女性生理生育因素亚组中呈现出与EGFR突变的相关性。(4)本研究发现淋巴结转移与EGFR突变相关(OR=0.176,95CI%=0.035-0.896)。对miRNA表达谱与EGFR突变的相关性分析显示,组织miR-25的表达与临床分期和淋巴结转移相关(P=0.0071,P=0.0445)。血浆miR-133a可能与远处转移相关(P=0.0277)。结论(1)女性非吸烟肺腺癌组织、血浆miRNA表达尚不具有一致性。(2)miR-25和miR-133a和EGFR突变可能存在机制上的相关性;miR-16可能成为晚期女性非吸烟肺腺癌患者血浆EGFR突变筛选的生物标志物。(3)miR-16、miR-133a可能与女性生理生育因素作用相关,miR-133a可能参与调节雌激素与EGFR通路之间的相互作用。(4)组织miR-25和miR-133a可能成为潜在的女性非吸烟肺癌临床转移预后的靶标。