在高等脊椎动物中,有体液免疫和细胞免疫两种免疫途径,分别由B细胞和T细胞介导。B细胞受体(BCR)复合物CD79a/b上存在免疫受体酪氨酸激活基序(ITAM),ITAMS基序上的酪氨酸残基瞬时磷酸化,可以产生临时结合位点以激活胞内信号分子,实现BCR的跨膜信号转导。在无颌类脊椎动物尽管没有以TCR、BCR及MHC主导的适应性免疫系统,但被发现通过新型可变淋巴细胞受体(variable lymphocyte receptor,VLR)形成了另一种类型的适应性免疫系统,能够产生免疫系统所需的多样性丰富的抗原识别受体分子。但VLR受体如何实现跨膜信号转导的分子机制尚未见报道。本研究首次在日本七鳃鳗中发现了一类新型含ITAM免疫球蛋白超家族受体(novel ITAM-containing immunogloblin superfamily receptors,NICIR),并对其进行分子克隆得到完整的开放阅读框(ORF),命名为Lja-NICIR。Lja-NICIR的ORF全长为864 bp,编码含有267个氨基酸残基的蛋白质。对LjaNICIR酶切位点进行分析,与表达载体pET-32a(+)构建重组质粒,通过转化导入E.coli Rosstte感受态细胞中进行原核表达,纯化出Lja-NICIR可溶性重组蛋白(rLja-NICIR)。用重组蛋白rLja-NICIR为抗原,对新西兰兔(Oryctolagus cuniculus)进行多次加强免疫制备出高效价的多克隆抗体。纯化后的抗体经免疫印迹法检测对重组蛋白Lja-NICIR以及组织内天然蛋白都有较强的特异性。利用siRNA干扰方法对Lja-NICIR基因mRNA转录进行了体内敲减实验,反转录PCR的检测,结果表明在白细胞中Lja-NICIR基因mRNA的转录水平在各个时间点均被敲低了,且敲低效果均大于50%,髓样小体中Lja-NICIR基因mRNA的转录水平敲低效果不明显,可能七鳃鳗产生反应抑制敲低作用,鳃组织中Lja-NICIR基因mRNA的转录水平在12 h和24 h敲低效果最好。在Lja-NICIR基因siRNA干扰24 h时间点检测到在白细胞,髓样小体中Lja-NICIR蛋白水平的表达量降低。在LPS和PHA免疫后,七鳃鳗白细胞,髓样小体,鳃组织中Lja-NICIR分子mRNA转录水平升高。在LPS和PHA免疫24 h时间点检测到白细胞,髓样小体Lja-NICIR蛋白水平的表达量升高,但在鳃组织中均未检测到Lja-NICIR蛋白的表达,说明Lja-NICIR可能参与了VLRB介导的免疫应答反应。此结果为后续深入探索Lja-NICIR分子的功能奠定基础。