【摘 要】
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目的:应用 RNA-Seq（RNA sequencing）技术对子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）和正常的子宫在位内膜转录本检测分析,找出差异基因丝氨酸蛋白酶抑制剂家族成员B2（SerpinB2）,并研究其在EMs的表达及意义。方法:1、RNA-seq技术分析实验组(2020年9月至2021年12月在江西省妇幼保健院妇科住院接受腹腔镜手术、病理检查确诊为EMs与对照组（同期该院住
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目的:应用 RNA-Seq（RNA sequencing）技术对子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）和正常的子宫在位内膜转录本检测分析,找出差异基因丝氨酸蛋白酶抑制剂家族成员B2（SerpinB2）,并研究其在EMs的表达及意义。方法:1、RNA-seq技术分析实验组(2020年9月至2021年12月在江西省妇幼保健院妇科住院接受腹腔镜手术、病理检查确诊为EMs与对照组（同期该院住院接受腹腔镜手术、病理检查确诊为对照组的单纯卵巢囊肿或者卵巢良性畸胎瘤的患者）在位内膜的转录组,筛选出差异表达的mRNA,从中选择SerpinB2作为研究对象。2、免疫组化检测实验组与对照组在位内膜组织SerpinB2的蛋白表达情况。3、实 时 荧 光定量 PCR（Quantitative Real-time Polymerase chain reaction,Q-PCR）技术检测实验组与对照组在位内膜组织SerpinB2的mRNA表达水平。4、提取实验组与对照组在位内膜间质细胞（Endometrial stromal cells,ESCs）,Western Blot检测实验组和对照组的ESCs中SerpinB2蛋白的表达水平。结果:1、以筛选条件为p-value＜0.05和log2FoldChange＞2,对实验组和对照组在位内膜进行差异基因筛选。实验组一共有上调基因632个,下调基因444个,从中我们选择了表达差异较大且未曾在EMs中被研究过的SerpinB2（log2FoldChange≈8.09,p-value＜0.05）进行研究。2、免疫组化检测组织中SerpinB2蛋白表达情况:实验组阳性的标本数为11（84.6%）,阴性的标本数为2（15.4%）;对照组组阳性的标本数为1（12.5%）,阴性标本数为7（87.5%）。实验组的阳性比例明显高于对照组组,差异有统计学意义（P＜0.05）。3、Q-PCR检测实验组和对照组在位内膜组织中SerpinB2 mRNA表达水平:SerpinB2 mRNA在实验组的表达明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。4、Western Blot检测实验组和对照组的ESCs中SerpinB2蛋白表达水平:SerpinB2蛋白在实验组中的表达明显高于对照组组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:SerpinB2在子宫内膜异位症在位内膜组织及间质细胞中均呈高表达,提示SerpinB2可能参与EMs的发病。
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