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本文着眼于研制一套小型化实时PCR仪中的光电检测系统,文章主要包括机电结构设计、光电检测系统设计、荧光信号检测实验三部分内容。 机电结构设计主要包括:热循环模块的机械设计,荧光检测模块的机电结构设计和仪器整体内部机械结构设计。 光电检测系统设计主要包括:光源及其驱动电路,光纤传导通路,滤光设计,光电探测设计,光电信号调理。光源及其驱动电路包括:光源的选择,光源的恒流驱动电路,光源功率的测试;光纤传导通路包括:光纤的选择,激发光路的设计及其传输耦合效率测试,发射光路的设计及其传输耦合效率测试;滤光设计了中心波长为530nm的高效带通滤光系统;光电探测设计包括光电探测器的选择及光电探测器的控制电路;光电信号调理包括:运算放大器的选择,荧光信号的放大电路及滤波电路。 最后,对所研制的光电检测系统进行了测试,包括噪声测试,蓝光荧光液荧光信号衰减测试,不同浓度的量子点荧光信号测试,PCR扩增过程中荧光信号的检测。初步测试结果显示,系统噪声在1mV以下,探测动态范围为105,能够探测浓度至少为10-7mol/L的量子点试剂所发射荧光信号。PCR扩增过程中荧光信号的检测使用人类免疫缺陷病毒(HIV-1)核酸定量检测试剂盒,该试剂盒又细分为以SYBR Green(Ⅰ)为染料的荧光染料法和以FAM为报告基团的TaqMan探针法的两种试剂盒,初步检测了上述试剂的荧光信号强度随PCR循环次数的变化曲线。 本文设计的实时PCR光电检测系统结构简单、体积小、成本相对较低、灵敏度可调、动态范围较宽,实现了对微弱荧光信号的激发与检测,为研制实时PCR样机奠定了良好的基础。