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目的:随着对组织工程ACL构建方法研究的不断深入,发现多种细胞生长因子在ACL愈合过程中起着关键的调控作用。其中TGF-β1和bFGF已成为研究ACL愈合的外源性生长因子的热点。ADM作为多种组织修复支架材料,其在临床中修复组织缺损已得到广泛应用。本实验的目的在于探讨特定浓度TGF-β1和bFGF对BMSCs在ADM支架上粘附,增值和分化的影响。并通过不同编织ADM重建兔ACL,比较重建ACL腱骨愈合,胶原含量分布和生物力学强度,从而为构建组织工程ACL提供实验依据。方法:1、将培养至第三代的兔BMSCs接种于ADM材料上,分别用普通培养液(对照组)及TGF-β1(浓度10ng/ml)和bFGF(浓度25ng/ml)培养液(实验组)培养,通过分别绘制第1、3、5、7、9、11天细胞增殖MTT曲线,第7天测定ALP含量,荧光显微镜及激光共聚焦扫描显微镜观察,分析编织ADM支架基本力学性能,以及两组培养液对细胞在ADM支架材料中的生长增殖,分化和粘附的影响;2、通过编织4股束形支架(对照组)和4股柱形支架(实验组)重建兔ACL,分别取材第6、12周重建ACL,通过大体观察关节功能和软骨退变、腱-骨HE染色、重建ACL天狼猩红染色及生物力学测试,分析两组编织方法ADM支架的力学性能,及细胞在支架上生长增值,分泌I,III型胶原以及腱-骨愈合的差异。3、应用SPSS12.0统计软件对数据进行统计学分析,P<0.05为统计学差异标准。结果:1、MTT曲线及荧光染色结果表明实验组培养液BMSCs在ADM支架上的粘附数量更多(P<0.05),ALP染色证明TGF-β1(浓度10ng/ml)和bFGF(浓度25ng/ml)能够促进BMSCs细胞分泌更多的ALP(P<0.05),激光共聚焦扫描显微镜显示实验组细胞粘附数量多,细胞形态更优良。2、重建兔ACL术后6、12周腱-骨及ACL染色表明,实验组较对照组腱-骨愈合速度更快,两组ACL分泌I、 III型胶原情况基本相当。术后12周,生物力学测试结果实验组ACL的生物力学性能明显优于对照组(P<0.05)。结论:1、TGF-β1(浓度10ng/ml)及bFGF(浓度25ng/ml)培养液对BMSCs在ADM上的生长,粘附及分化有明显的刺激增强效果。2、编织ADM支架具备一定的生物力学强度,其中4股编织柱形ADM支架在兔体内能够促进细胞分泌I,III型胶原,并提供较好的腱-骨愈合速度及生物力学强度。