饮食性缺锌对鼠牙发育矿化的影响

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目的:在大鼠仔鼠哺乳期及生长发育后期(直至磨牙牙根发育完成)设置缺锌组(ZD组)、锌足量组(ZA组)及配对喂养组(PF组),通过肉眼观察、显微硬度的测量、扫描电镜观察及HE染色等方法,比较各组仔鼠鼠牙的发育矿化情况,探讨锌对鼠牙发育矿化的影响,以期了解饮食性缺锌对鼠牙发育矿化的影响。方法:将9只即将分娩的妊娠约20天的SD孕鼠随机分为3组,分别为缺锌组(ZD组)、锌足量组(ZA组)、配对喂养组(PF组),每组3只,分笼饲养。自母鼠分娩之日起,ZD组饲以低锌饲料,含锌量约为8mg/kg饲料,自由采食;ZA组饲以标准纯化饲料,含锌量约为38mg/kg饲料,自由采食;PF组所食饲料与ZA组相同,但与ZD组各只鼠对饲,即该组大鼠所饲饲料的量为ZD组大鼠前一天所饲的量。各组鼠均饮用超纯水,以避免饮水中锌对本实验的干扰。仔鼠断乳后,饮食饮水同各组母鼠直至仔鼠出生后38天,获得各组仔鼠各10只。各组仔鼠采血,分离制备血清,测定各组血清锌浓度。各组仔鼠处死,分离下颌骨,获得实验标本。首先,在自然光条件下,肉眼观察各组仔鼠下颌切牙牙冠表面的色泽和光滑性。然后,选取各组下颌切牙制备样本,测量各组仔鼠牙釉质牙本质的显微硬度。同时,制备各组下颌切牙横断面及纵剖面样本并运用扫描电子显微镜(Scanning electronic microscope,SEM)观察牙釉质和牙本质的超微结构。最后,对下颌骨组织进行HE染色,观察各组仔鼠下颌切牙胚和第一恒磨牙近中邻面牙本质的组织形态结构。采用SPSS 19.0软件包对获得的数据进行统计分析,P<0.05有统计学意义。结果:1、肉眼观察可看到ZD组下颌切牙颜色较深,光泽度欠佳、牙冠表面较粗糙;其余两组颜色较浅、光泽度比ZD组好,牙冠表面均较光滑。2、无论是血清锌浓度值,还是牙釉质牙本质的显微硬度值,ZD组均低于其它两组,且差异具有统计学意义;而ZA组和PF组之间的差异不具有统计学意义。3、牙釉质SEM观测结果发现:ZD组釉质部分区域结构模糊,釉柱排列相对不规则,釉柱内有较大孔隙,柱间质区域范围较其它两组大;其余两组釉质结构清楚,釉柱排列相对规则,釉柱内未见较大孔隙。牙本质SEM观测结果发现:无论是横断面还是纵剖面,ZD组牙本质小管分布不均,相同放大倍数下,该组小管的数目较ZA组和PF组少,在排列的规则性及管径的均匀性方面均不如其它两组;而ZA组和PF组在这些方面均未见明显的区别。4、HE染色结果见:ZD组下颌切牙胚成釉细胞排列紊乱,可观察到大量空泡样结构;PF组亦可观察到大量空泡样结构;ZA组成釉细胞排列整齐,未观察到明显的空泡样结构。ZA组的釉基质层厚度宽于ZD组,与PF组相当;牙本层厚度宽于其它两组。ZD组下颌第一恒磨牙近中邻面见成牙本质细胞空泡性变,前期牙本质层稍增宽,球间牙本质明显多于其它两组,其余两组未观察到空泡性变的成牙本质细胞。结论:1、饮食性缺锌可引起大鼠前牙成釉细胞发生形态改变,釉基质变薄,釉质矿物质含量减少,釉质微观结构改变。2、饮食性缺锌可使大鼠前牙牙本质矿化出现障碍,矿物质含量减少,牙本质小管分布、数目、开口形状及均质性受到影响。同时,可导致大鼠磨牙成牙本质细胞空泡性变,牙本质矿化紊乱。3、饮食性缺锌对鼠牙发育矿化的影响只与锌元素本身的缺乏相关,与缺锌所导致的机体摄入量减少无关。
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