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目的:急性髓系白血病（Acute myeloid leukemia, AML）是一种获得性髓系定向祖细胞变异而产生的克隆性疾病，具有高度异质性。t(8;21)(q22;q22)易位是AML中最常见的染色体易位，可以产生AML1-ETO融合基因。目前已知表观遗传学的改变，如同基因缺失、突变和易位等遗传学改变一样，在AML的发生发展中起着很重要的作用，主要包括DNA甲基化，组蛋白修饰和microRNA(miRNA)。由于AML1-ETO单独表达并不能引发白血病，需要与其它基因异常协同方能引起白血病。因此，本研究通过人类基因组甲基化芯片筛查出在AML1-ETO阳性白血病患者中具有特异性表达的THAP10，旨在探讨AML1-ETO阳性急性髓系白血病中，AML1-ETO融合基因通过表观遗传学调控靶基因THAP10的表达，参与AML1-ETO阳性白血病发生发展的机理，从而为难治复发型急性髓系白血病提供新的治疗靶点。
材料与方法:利用人类全基因组甲基化芯片Infinium Human Methylation450 BeadChip筛选出AML1-ETO阳性AML细胞中甲基化水平显著高于AML1-ETO阴性AML细胞的基因THAP10。根据生物信息学发现，在THAP10基因上游启动子区-2000～+1bp内含有7个AML1结合位点，构建THAP10不同结合位点的双荧光素酶报告载体pGL3-THAP10，用双荧光素酶报告系统检测AML1-ETO在THAP10启动子区的结合情况。实时荧光定量PCR及WesternBlot观察AML1-ETO阳性和阴性白血病细胞系中THAP10 mRNA及蛋白表达水平变化。硫化测序检测THAP10启动子区甲基化状态，并采用染色质免疫共沉淀的方法进一步探究表观遗传学调控THAP10表达的机制。酶标仪与流式细胞术检测转染THAP10及THAP10-siRNA细胞中，细胞增殖与凋亡的影响。
结果:双荧光素酶报告实验说明AML1-ETO能够结合到THAP10的上游启动子区，提示AML1-ETO可以调控THAP10基因的表达。实时荧光定量PCR及Western Blot证实在AML1-ETO阳性细胞系中THAP10 mRNA及蛋白表达水平明显下调。硫化测序表明在AML1-ETO阳性急性白血病中，THAP10启动子区出现异常高甲基化，而在AML1-ETO阴性白血病及正常人中该基因启动子区甲基化水平明显较低。AML1-ETO阳性急性白血病细胞系Kasumi-1及SKNO-1中异常高表达THAP10，可以抑制细胞增殖，但对细胞凋亡无作用。通过RNA干扰抑制THAP10表达后，细胞增殖明显增加。
结论:人类THAP10可能是一个抑癌基因，在AML1-ETO阳性急性髓系白血病中出现特异性高甲基化及低表达，从而加剧白血病细胞恶性增殖。体外转染导致异常高表达THAP10，可以抑制白血病细胞增殖，是一个潜在的治疗靶点。