TLRs在大鼠骨关节炎软骨中的表达及降钙素干预对其的影响

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目的:探讨软骨细胞内Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)在骨关节炎(Osteoarthritis,OA)进程中表达的特点,以及受降钙素(Calcitonin,CT)干预后的影响。方法:将75只SD大鼠随机分为三组,手术组与CT干预组各35只,假手术组5只。对手术组与CT干预组的右膝行前交叉韧带切断加内侧半月板切除术,左膝作为空白对照,不予手术。假手术组的右膝只进入关节腔,不处理交叉韧带和半月板。CT干预组动物于术后第二天始行CT15IU/kg隔日皮下注射。前两组大鼠分别于术后7、10、14、21、28、42及56天处死,每组每次处死5只,假手术组动物于术后56天处死并提取标本。对标本进行大体和组织学切片观察。另用Real-time PCR法对手术组和CT干预组动物双膝关节内的软骨标本分别进行TLR2、TLR3、TLR4表达的检测。结果:手术组大鼠造模7天后可见组织学变化;10天后大体观察出现软骨面暗淡,失去光泽;28天后可见骨赘形成;56天后见软骨缺损,软骨下骨外露。Mankin评分由7天的1.0分到28天的6.6分发展到56天的12.2分,与假手术组相比有显著差异。与手术组相比在同一时间点上,CT干预组大鼠的滑膜增生较少;软骨损伤较轻;骨赘形成较小;Mankin评分也较低。手术组膝关节的软骨细胞中TLR2的表达早期增高,晚期明显受到抑制;TLR3的表达与病变严重程度呈正相关性;TLR4表达增高,但不随病程发展而变化。降钙素干预后TLR2表达早期受到抑制,28天后开始增高;TLR3的表达早期也受到抑制,但随着病程的进展表达逐渐的升高;TLR4的表达在早期也同样受到了抑制。结论:采用前交叉韧带切断加内侧半月板切除术可以有效的制作大鼠的OA模型;OA病程中,软骨内有TLRs的表达,TLR2先增高后降低;TLR3与病变严重程度呈正相关性;TLR4高表达但在病程中无明显变化。加用降钙素干预后,尤其是在早期,可明显抑制TLRs的表达,OA的症状也明显改善,在OA早期阶段有一定的治疗作用。
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