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背景与目的妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)严重危害母婴健康并与多种不良妊娠结局密切相关。目前多认为胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)是GDM和2型糖尿病的共同发病机制之一。环境因素对IR的作用引起人们更多的关注,研究表明,高热量高脂饮食是导致肥胖和胰岛素抵抗的重要因素。国内外大量研究发现：脂联素(Adiponectin, APN)和腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)作为调节胰岛素和糖脂代谢的关键因子,在肥胖和2型糖尿病患者的胰岛素抵抗中发挥了重要作用,但它们与GDM胰岛素抵抗的关系尚不明确。妊娠期间饮食干预能改善妊娠期糖尿病的IR,其分子学机制有待研究。本实验通过观察高糖高脂饮食妊娠大鼠脂肪组织脂联素和骨骼肌AMPK基因的表达水平及饮食干预后的变化,初步探讨脂联素和AMPK基因的表达与妊娠期胰岛素抵抗的关系及饮食干预改善IR的分子学机制。材料与方法选取健康6周龄SD大鼠雌性75只和雄性24只,体质量180-200g。所有雌性大鼠用普通饲料适应性喂养1周后,再随机分为以下5组：正常饮食非孕鼠组(NV组15只)、正常饮食孕鼠组(NP组15只)采用国家标准齿类饲料饲养；高糖高脂饮食非孕鼠组(HV组15只)、高糖高脂饮食孕鼠组(HP组15只)和高糖高脂饮食孕后饮食干预组(GHP组15只)给予高糖高脂饲料喂养。不限食水,喂养6周后,孕鼠组与雄性SD大鼠按2：1比例合笼,次晨发现阴道黏液栓或镜检有精子(+)计为孕1d。妊娠第18天行口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test, OGTT),在妊娠第20天禁食12h后测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FPG)和胰岛素(FINS)等指标,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);应用RT-PCR测定脂肪组织APN mRNA和骨骼肌组织AMPKα2mRNA的表达。采用SPSS17.0统计学分析软件进行数据分析,比较各组之间总胆固醇,甘油三酯,空腹血糖,空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数的变化；比较各组脂联素和AMPK基因的表达水平,并与胰岛素抵抗指数做相关性分析。结果(1)与HV组、NP组和NV组比较,HP组大鼠体重、血脂、空腹血糖、胰岛素和HOMA-IR均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)；与HP组对比,GHP组大鼠的上述各项指标明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)；GHP组大鼠的上述各项指标明显高于NP组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)HP组与其他4组结果比较,在0、30、60、120分钟血糖水平均有明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)；与NV组比较,NP组和HV组血糖也有明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)；GHP组与NP组比较,血糖明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)；GHP组与HP组比较,血糖明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)与HV组、NP组和NV组比较,HP组大鼠脂联素mRNA的表达水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)；GHP组脂联素mRNA的表达水平仍明显低于NP组(P<0.05)；与HP组比较,GHP组脂联素mRNA的表达水平明显升高(P<0.05)；HV组脂联素mRNA的表达水平与NV组和NP组比较明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)与HV组、NP组和NV组比较,HP组大鼠骨骼肌组织AMPK α2mRNA的表达水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)；GHP组的AMPK α2mRNA表达水平明显低于NP组(P>0.05)；GHP组与HP组的AMPK α2mRNA表达水平无明显差异性(P>0.05)；HV组骨骼肌组织AMPK α2mRNA的表达水平与NV组和NP组比较明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(5)相关性分析显示,HP组大鼠脂肪组织脂联素(APN)mRNA和骨骼肌组织AMPK α2mRNA的表达水平均与HOMA-IR呈负相关(r=-0.718.-0.627；P=0.013,0.039)；而HP组大鼠脂联素(APN)mRNA与AMPK a2mRNA的表达水平呈正相关(r=0.647,P=0.031)。结论1.高糖高脂饮食喂养妊娠大鼠可以建立临床妊娠期糖代谢异常的大鼠模型：2.高糖高脂饮食喂养妊娠大鼠脂肪组织中APN和骨骼肌组织中AMPK基因低表达,可能共同参与了妊娠期糖尿病IR的发生、发展；3.妊娠期间饮食干预能改善大鼠妊娠期糖尿病的IR,其机制可能与饮食干预后脂联素表达水平升高有关,饮食干预对AMPK的影响有待于进一步研究。