论文部分内容阅读
【研究目的】 通过实验观察病理性大鼠肺组织发生的变化，观测炎性细胞、趋化因子MIP-1α、MCP-1在矽肺进程中的改变，研究不同期别矽肺诱导痰中MIP-1α、MCP-1发生改变的意义。 【研究方法】 动物实验：将168只雄性大鼠随机分为四组，分别设对照组、15、30、60 mg/ml剂量的染尘组。采用非气管暴露法一次性气管注矽尘。选取第1d、3d、7d、14d、21d、28d时间点于每组各取7只处死，对其肺组织HE染色后观察病理改变；同时对采集支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎性细胞计数，酶联免疫吸附法（ELISA）测定 BALF 中MIP-1α、MCP-1的含量，讨论MIP-1α、MCP-1在矽肺炎症进程中作用。 人群研究：选取某金矿200名作业工人，分设40例Ⅰ期矽肺患者组，40例Ⅱ期矽肺患者组，80 例接尘组，40 例对照组。诱导取痰后做痰涂片，观察炎性细胞改变，酶联免疫吸附法检测痰液中MCP-1和MIP-1α的含量。发放问卷调查，查阅职业卫生管理部门存档资料了解人群对象的一般情况，同时对人群对象的总粉尘累积接触量进行调查和公式计算，分析人群研究对象总粉尘累积接触量与 MIP-1α、MCP-1 检测水平的相关关系。 【研究结果】 一、矽肺早期MIP-1α、MCP-1变化规律的实验研究 1、染尘大鼠毒后肺组织早期病理学变化 大鼠肺组织对照组基本可以保持正常组织生理结构，没有明显炎症反应；1-3d后观察到各剂量组染尘大鼠肺组织血细胞开始浸润，并有少量中性粒细胞和巨噬细胞浸润肺泡间隔；炎症细胞自 7d 后开始出现于肺泡腔，主要为中性粒细胞、巨噬细胞，肺泡间隔变宽变大；自14d后部分肺泡出现结构性损坏，可见大量炎性细胞（巨噬细胞）聚集，肺泡间隔增大；21d后肺泡构造破坏严重，肺泡间隔明显缺失，肺泡腔大面积减少，细胞结节开始显著增多，淋巴细胞成为最多的炎性细胞；28d肺泡构造损坏加重，成纤维细胞偶尔可见。 2、染矽尘大鼠BALF中炎性细胞数目改变 在第1d、3d、21d、28d时，染矽尘大鼠BALF中白细胞数量相对于对照组白细胞数量明显增多，并随剂量出现白细胞数量显著不同（P＜0.05）；自7d、14d对照组白细胞总数较染尘组出现增高。 3、染尘大鼠BALF中MIP-1α、MCP-1含量变化 各剂量染尘组大鼠BALF中的 MIP-1α、MCP-1浓度在各时刻点较对照组均出现差异水平的增高，差别有统计学意义（P＜0.05），各剂量染尘组随染尘量的增大，MCP-1检测水平逐渐升高，MIP-1α含量剂量反应关系不明显。 4、各染尘组大鼠BALF中MIP-1α、MCP-1浓度与白细胞数量的相关性分析 大鼠BALF中MCP-1浓度与MIP-1?浓度成正相关（r= 0.6271，p=0.0000）；MIP-1?、MCP-1浓度均与白细胞水平呈弱相关。 二、矽肺进程各期段MIP-1α、MCP-1含量改变的现场研究 1、诱导痰细胞学研究 人群实验各分组对象诱导痰中白细胞总数差异存在统计学意义(P＜0.05)；接尘组与矽肺Ⅰ期组相比，人群对象白细胞总数出现显著降低(P＜0.05)，剩余几组白细胞总数之间差异不显著（P＞0.05）；而中性粒细胞组间差异不显著(P＜0.05)。与对照组相比，矽肺Ⅰ期组、矽肺Ⅱ期组与接尘组的中性粒细胞差异更大，具有统计学意义(P＜0.05)。 2、诱导痰中MIP-1α、MCP-1含量比较 矽肺Ⅰ期组、矽肺 Ⅱ期组与对照组相比，MIP-1α、MCP-1水平显著增加，差异有统计学意义（P＜0.05＝；矽肺Ⅰ期组、矽肺Ⅱ期组与对照组相比，MIP-1α、MCP-1水平在矽肺Ⅰ期组、矽肺Ⅱ期组明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。 3、诱导痰中MIP-1α、MCP-1水平与接尘量的相关分析 按累积总粉尘接触量分组，各组间MIP-1α、MCP-1水平差异有显著性（P＜0.05）；MIP-1α、MCP-1 在诱导痰中的水平随工人接尘量的增加逐步增加，相关分析表明，MIP-1α、MCP-1在诱导痰中的水平与工人接触粉尘量存正相关关系，r值分别为0.355、0.359( P＜0.05）。 【研究结论】 1、建立的大鼠矽肺模型肺组织病理改变可较好反映矽肺前期炎性反应过程。炎性细胞水平变化显著 ，与染尘的时间和剂量相关。 2、染尘大鼠BALF中的MIP-1α、MCP-1含量可能存在级联反映，MCP-1和MIP-1α在肺组织纤维化进行性进展存在着协同促进关系。MCP-1和MIP-1α水平随染尘时间变化不明显，但随染尘剂量的增加BALF中MCP-1含量有增高的趋势，MIP-1α含量剂量反应关系不明显，MCP-1更适合作为反应矽肺肺纤维化程度的敏感指标。 3、细胞水平上一定程度反应矽肺进展中肺组织的炎症反应可以通过诱导痰中MIP-1α、MCP-1含量变化来反映，粉尘暴露量与MIP-1α、MCP-1水平之间存在着正相关关系，MIP-1α、MCP-1作为矽肺早期检测生物标志物具有可行性。