KAI1基因对大肠癌细胞系生物学特性的影响及其与大肠癌转移的相关性研究

来源 :中国人民解放军第一军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:logepark
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KAI1基因是新近发现的一个肿瘤转移抑制基因,定位于人染色体11p11.2,Dong等首先分离并发现了KAI1基因可抑制前列腺癌的转移。KAI1 mRNA在大多数的上皮组织如前列腺、乳腺、膀胱、胰腺等有丰富的表达,其蛋白质产物为CD82,是TM4SF(transmembrane 4superfamily)或称TST(tetra span transmembrane)家族成员。该家族的大多数成员是白细胞表面CD抗原,结构的最大特点是有4个跨膜区和一个较大的膜外亲水区,亲水区有3个潜在的糖基结合位点,提示它在细胞与细胞粘附、细胞与基质的连接中有一定的作用。KAI1/CD82和其他TM4SF成员、整合素、E-钙粘素等互相连接,可以把细胞外的信号传导至细胞内信号传导通路,引起细胞内多种结构和功能的变化,从而影响细胞粘附、侵袭和转移等。 为了研究KAI1基因与大肠癌转移的相关性,本研究以大肠正常粘膜、大肠癌组织、淋巴结转移癌为研究对象,从mRNA与蛋白质水平,用原位核酸杂交、免疫组织化学方法检测KAI1/CD82的表达,两种方法得到的结果一致:KAI1/CD82在大肠正常组织、大肠癌、淋巴结转移癌三组表达有显著性差异(P<0.05),在大肠癌表达水平较高。在大肠癌组织中,KAI1/CD82的表达水平与组织学分级无关(P>0.05),而与Dukes分期、淋巴结转移有关(P<0.05),Dukes A、B期的大肠癌表达水平较Dukes C期表达水平高,差异有显著性(P<0.05)。在淋巴结转移癌KAI1/CD82表达几乎缺如。以上结果说明KAI1/CD82表达与大肠癌转移存在相关性,即在大肠癌早期阶段表达升高,晚期下调,转移时可能缺失。因而认为大肠癌KAI1的高表达与大肠癌转移存在负相关关系,与患者的预后相关。 为了进一步探讨KAll基因对大肠癌细胞生物学特性的影响,本研究选用高转移潜能的大肠癌细胞株LoVo,利用基因转染技术将KAllcDNA导入LOV。细胞,用原位杂交和免疫组化的方法鉴定转染后LOVo细胞KAll的表达,利用体外的粘附侵袭实验分析KAH基因对大肠癌细胞粘附侵袭转移能力的影响。实验结果表明KAn基因可增加肿瘤同质性细胞粘附,抑制肿瘤与基质的异质性粘附,转染后的细胞聚集能力比对照组明显增强,用CD82单克隆抗体处理转染后的细胞,发现细胞聚集能力进一步增强。在肿瘤的侵袭转移实验中,转染后的细胞对基底膜和内皮细胞的侵袭能力明显降低,与对照组相比差异有显著性 (P(0 .05)。 总之,我们的结果证明KAn基因是一种肿瘤转移抑制基因,检测KAH基因表达对判断大肠癌的预后、制定治疗策略及抗转移研究具有重要意义。
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