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目的:
通过采用淋巴管特异性标记物D2-40抗体对肿瘤组织中的淋巴管进行标记,并测定肿瘤组织中的微淋巴管密度(MLD),探讨胸苷磷酸化酶(TP)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达与肿瘤组织及癌旁组织中微淋巴管生成的关系,研究TP、微淋巴管密度在食管鳞状细胞癌淋巴转移中的意义,分析TP对食管鳞状细胞癌临床病理特征,治疗及预后的价值。
方法:
选取2009年4月-2010年7月泰安市中心医院普胸外科行手术切除并具备详细临床资料的食管鳞状细胞癌患者的石蜡包埋癌组织标本40例,其中男性29例,女性11例。所有入选病例行手术前均未进行化疗,放疗和免疫等治疗。其中高分化癌20例,中低分化癌20例;肿瘤长度>5cm者21例,肿瘤长度《5cm者19例;侵及粘膜-肌层的17例,侵及食管纤维外膜的23例;有淋巴结转移者25例,无淋巴结转移者15例。另取10例病理检查确认为正常的食管组织为对照组。应用免疫组化EnVision法对食管鳞状细胞癌及其相应正常食管组织中胸苷磷酸化酶(TP)的表达进行检测,同时采用淋巴管特异性标记物D2-40抗体对食管鳞状细胞癌和正常食管组织进行染色标记,并计数其微淋巴管密度(microlymphatiedensity,MLD),应用计算机图像分析软件Image-ProPlus6.0(IPP6.0)进行病理切片染色图像的分析整理,旨在观察D2-40与胸苷磷酸化酶(TP)在食管鳞状细胞癌中的表达特点及与食管鳞状细胞癌相关病理因素的关系,并探讨D2-40标记的MLD和TP与食管鳞状细胞癌中淋巴管生成和淋巴转移的关系。
结果:
实验结果显示TP主要在细胞浆内表达,显微镜下阳性细胞的胞浆呈棕黄色或棕褐色。病理分期较晚及淋巴结转移阳性率高的食管鳞状细胞癌组织内的TP表达阳性率明显高于食管正常组织、病理分期较早及淋巴结转阳性率低的食管鳞状细胞癌组织,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。TP表达与食管癌的分化程度、淋巴结转移、浸润深度相关,但与患者的年龄、性别、肿瘤大小无关。D2-40表达于食管鳞状细胞癌组织及癌旁组织的微淋巴管内皮细胞中,呈棕黄色。病理分期较晚及淋巴结转移阳性率高的食管鳞状细胞癌组织内MLD值显著高于食管癌旁组织、病理分期较早及淋巴结转移阳性率低的食管鳞状细胞癌组织内MLD值(P<0.05);MLD与食管癌组织的分化程度、淋巴结转移、浸润深度相关,但与患者的年龄、性别、肿瘤大小无关。所有病例TP阳性组的MLD值显著高于TP阴性组的MLD值(P<0.05)。
结论:
在病理分期较晚及淋巴结转移阳性率高的食管鳞状细胞癌组织内的TP的表达水平和MLD值明显高于食管癌旁组织、病理分期较早及淋巴结转移阳性率低的食管鳞状细胞癌组织,提示TP在食管鳞状细胞癌中的过度表达可能促进微淋巴管生成,进一步促进肿瘤局部浸润、淋巴结转移和远处转移。检测TP的表达情况及MLD的值有助于判断食管鳞状细胞癌的临床病理分期情况及为评价患者预后提供依据。使用计算机辅助图像分析系统能定量的测量食管鳞状细胞癌标本切片免疫组化显示的胸苷磷酸化酶和D2-40的含量,可以作为研判肿瘤分化、浸润深度、淋巴结转移等生物学行为的判断指标。