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随着我国进入老龄化社会，脑血管疾病已是一种主要的致死、致残的常见病，它与心脏病、恶性肿瘤共同构成人类的三大主要致死病因。特别是象脑血管性痴呆、阿尔茨海默病、皮质下动脉硬化性脑病等由慢性脑缺血导致的脑血管病，症状较为隐袭，病情逐渐进展。因此，对慢性脑缺血进行研究，找出有效的治疗和预防措施是非常有意义的。慢性脑缺血是指脑部因慢性的血供不足，而导致脑代谢障碍和功能衰退，可引起眩晕、耳鸣、智力减退、记忆力下降或注意力不集中、定向力障碍等多组疾病。多数学者研究中发现在对大鼠进行合理分组的基础上对其海马CA1区和齿状回分子层行突触素免疫活性定量分析，结果显示同为老年大鼠，记忆损害的较记忆正常的大鼠海马结构突触素免疫组织化学染色灰度值显著降低，且老年大鼠平均逃避潜伏期与其海马、齿状回突触素免疫组织化学染色灰度值呈负相关。这些结果都强烈提示：老年学习记忆减退与海马结构突触素的变化密切相关。血管性痴呆(Vascular Dementia,VD)小鼠海马CA1区神经元N-甲基-D-天门冬氨酸(N-Methyl-D-Asparate，NMDA)受体2B亚单位(NR2B)mRNA表达减少，与其学习和记忆成绩降低相一致。因此推测NR2BmRNA的表达减少可能参与了VD发病的分子生物学机制。VD小鼠海马组织CA1区NR2B的mRNA表达减低的机制，可能与海马缺血、缺氧致神经元死亡或结构受损有关，也可能与神经元长期低代谢影响神经传递有关。丁基苯酞(dl-butylphthalide)化学名称为消旋-3-正丁基苯酞，商品名恩必普(NBP)，与芹菜籽中提取的左旋芹菜甲素的结构相同，为其人工合成的消旋体。临床研究结果表明，丁基苯酞对急性缺血性脑卒中患者的中枢神经功能的损伤有改善作用，可促进患者功能恢复。它可能通过降低花生四烯酸含量，提高脑血管内皮细胞一氧化氮和前列腺素L2的水平，抑制谷氨酸释放，降低脑细胞内钙浓度，抑制自由基和提高抗氧化酶活性等机制而产生上述药效作用。本文旨在观察丁基苯酞对慢性脑缺血老龄大鼠海马中突触素及NR2B表达的影响。材料方法1．实验动物与分组健康Wistar大鼠80只，雌雄不拘，12-14月龄，体重450-550克。随机分为4组，每组20只，A组：对照组(假手术+溶剂)；B组：单纯缺血组(手术+溶剂)；C组：缺血低剂量治疗组(手术+低剂量丁基苯酞+溶剂)；D组：缺血高剂量治疗组(手术+高剂量丁基苯酞+溶剂)；C组和D组于造模2个月后分别按60mg／kg、120mg／kg给予丁基苯酞每日灌喂，丁基苯酞用花生油稀释至2ml。A组和B组于造模2个月后每日给于花生油2ml灌喂，各组皆连续灌喂1个月。2．模型制作钝性分离单纯缺血组和缺血高、低剂量治疗组大鼠双侧颈总动脉，用0号手术线分别结扎其近心端及远心端；分离对照组双侧颈总动脉但不结扎。术后各组大鼠均在常规条件下饲养。3．标本制作手术3个月后，将大鼠经心脏灌注后，断头取左脑，用4％的多聚甲醛固定后做石蜡切片，供HE染色和免疫组化染色使用。4．观察指标4．1采用HE染色观察大鼠海马神经元细胞的变化4．2免疫组化观察突触素和NMDA受体亚单位NR2B表达的变化5．统计方法所有数据均采用均数±标准差((?)±s)表示，应用SPSS11.0统计软件进行数据处理，多组间比较采用单因素方差分析，用LSD法进行两两比较，取α=0.05作为显著性检验标准。结果1．实验动物一般情况术后各组大鼠均出现精神萎靡，反应迟钝，进食减少。术后1天，A组大鼠精神恢复；B、C、D组大鼠改善不明显。3—5天B、C、D组大鼠逐渐恢复，1周时反应、进食正常。2．HE染色观察海马神经元细胞，A组：变性、死亡不明显，神经细胞数目多，排列紧密而整齐，细胞界限清晰B组：大量变性、死亡，神经细胞数目减少、排列紊乱，胞间距离增大。C组：神经元变性、死亡较B组减轻，正常神经元细胞数目较B组多。D组：神经元变性、死亡和神经细胞数目减少较C组为轻。3．突触素免疫组化染色各组均取海马的CA1区、CA3区和齿状回三处进行观察并统计突触素灰度值，CA1区：A组：156.38±3.69；B组：125.62±11.52；C组：142.77±3.95；D组150.01±4.98；CA3区：A组：154.10±4.27；B组：120.47±6.49；C组：140.16±5.07；D组：146.47±4.86；齿状回区(Dentate Gyrus，DG)：A组：140.00±4.59；B组：111.55±5.33；C组：128.05±4.48；D组：134.22±4.19。B组与A组相比，突触素的表达明显下降，差异具有统计学意义(P＜0.05)；C组、D组与B组相比突触素的表达增高明显，差异具有统计学意义(P＜0.05)；D组与C组相比突触素的表达增高，且差异具有统计学意义(P＜0.05)。4．NMDA受体亚单位NR2B免疫组化染色各组均取海马的CA1区、CA3区和齿状回三处进行观察并统计NMDA受体亚单位NR2B灰度值，CA1区：A组：169.54±3.36；B组：135.00±6.48：C组：155.97±3.97；D组161.07±5.29；CA3区：A组：163.07±3.57；B组：130.28±7.81；C组：150.55±4.67；D组：155.00±5.15；齿状回区：A组：151.62±4.34；B组：121.50±4.85；C组：137.93±4.17；D组：144.08±3.71。B组与A组相比，NR2B的表达明显下降，差异具有统计学意义(P＜0.05)；C组、D组与B组相比NR2B的表达增高明显，差异具有统计学意义(P＜0.05)；D组与C组相比NR2B的表达增高，且差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论1．慢性脑缺血3个月后，老龄大鼠海马结构内CA1区、CA3区及齿状回内突触素和NR2B的表达明显减少。2．丁基苯酞可使慢性脑缺血老龄大鼠海马结构内CA1区、CA3区及齿状回内突触素和NR2B的表达增加。