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目的：研制单增李斯特菌特异性免疫磁珠，结合免疫磁珠富集技术与选择性平板培养法，初步建立免疫磁珠-选择性平板快速检测方案，对单增李斯特菌进行分离及鉴定。同时，利用免疫磁珠富集技术进行样品前处理，联合环介导等温扩增技术，建立一种快速检测单增李斯特菌的新方法。方法：利用分泌单增李斯特菌单克隆抗体的杂交瘤细胞（1B10A7），制备并纯化腹水型单抗；选择三种表面官能团不同的磁珠制备特异性免疫磁珠；通过比较免疫磁珠捕菌率高低挑选合适磁珠，建立免疫磁珠-选择性培养基检测方法；通过特异性分析、灵敏度分析及牛奶样品检测评价该方法的检测效果。随后，以单增李斯特菌毒力基因hly和prfA为模板设计环介导等温扩增引物，经阳性筛选、交叉菌筛选及荧光定量PCR挑选最佳引物，PCR扩增产物经分子克隆后测序鉴定；建立免疫磁珠-环介导等温扩增检测方法，通过灵敏度分析和牛奶样品检测对该方法进行评价。结果：制备了效价为6×10~4的腹水型单抗，单抗偶联磁珠后，选择捕菌率最佳的Dynal甲苯磺酰基活化磁珠进行后续试验；特异性免疫磁珠联合选择性平板法可检出浓度为103CFU/mL及以上的单增李斯特菌，仅与英诺克李斯特菌存在交叉反应；牛奶样品单次仅需6h增菌能被检出，较常规增菌时间缩短42h；检测限为0.7CFU/mL。经筛选获得一组prfA基因高特异性且扩增效率最高的引物对，扩增产物经测序鉴定与靶序列吻合；免疫磁珠-环介导等温扩增检测方法检测灵敏度为10~1CFU/mL，对牛奶样品的检测限为1CFU/mL。结论：联合使用免疫磁珠富集技术与选择性培养基，能在30h内完成对牛奶样品的检测，较国标法减少42h以上，且具有同等的灵敏度。免疫磁珠-环介导等温扩增检测方法具有高特异性、高灵敏度及快速检测的优势，在不进行预增菌的情况下对含菌量较低的阳性样品亦可检出。本研究结合免疫磁珠富集技术，初步建立了单增李斯特菌快速检测方法，通过进一步的条件摸索及优化，日后有望应用到食品安全监测工作中。