新型高效硫氰酸盐降解复合菌群的特征分析及解毒评价

来源 :江西农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaofyk
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
硫氰酸盐(SCN-)是一种常见的金矿、纺织、印染和焦化工业污染物,有毒性、给生物安全带来危害。当前,针对硫氰酸盐废水的污染治理迫在眉睫,常见的治理方法主要包括化学氧化、物理吸附以及生物处理。生物处理法作为一种高效、无污染、低成本的污染物处置方式,被认为是硫氰酸盐废水污染最有前景的修复手段之一。然而生物处理普遍存在耐受硫氰酸盐浓度低,解毒不彻底的问题。因此,构建高效、耐高盐、解毒彻底的硫氰酸盐降解复合菌群是非常有必要的,这将推动硫氰酸盐废水降解走向新高度。本研究以工业废水常见污染物硫氰酸盐为底物,定向构建一组具有高效降解性能的复合菌群。以该复合菌群为研究对象,采用16S r RNA高通量测序技术解析其微生物演变过程,挖掘功能微生物。此外为了提高复合菌群的降解性能对其培养条件进行优化,对耐盐度进行定向驯化。为了解复合菌群降解硫氰酸盐规律,对其降解动力学进行了研究,同时加以高浓度硫氰酸盐废水的降解,使其适用于工业化应用。为了进一步探究复合菌群降解硫氰酸盐的彻底性,对硫氰酸盐及其代谢产物进行了毒理学评价。主要研究成果如下:(1)从活性污泥中定向构建一组硫氰酸盐高效降解复合菌群,可稳定降解154.64m M硫氰酸盐,降解过程中产酸,降解产物中有SO42-、NH4+等。经过形态学观察发现,复合菌群以黄色放射状的菌胶团形式分散在发酵液中;扫描电镜观察发现该复合菌群由杆状、球状等多种不同形状且大小不一的菌株组成,且相互紧密地附着在一起,菌体的表面呈现绒毛状;球状复合菌群的形成有利于硫氰酸盐的降解。(2)单因素实验研究结果表明,复合菌群的最佳接种量为6 g/L,p H值为7.0,温度为30℃,摇床转速为180 rpm;硫酸铵的浓度影响硫氰酸盐降解,硫酸铵浓度越高,硫氰酸盐降解速率越慢;外源碳氮源的添加虽然能有效提高生物量,但是硫氰酸盐降解速率却减缓;复合菌群在盐浓度20 g/L条件下,24小时内硫氰酸盐降解率为30%以上,72小时降解率可达100%。(3)响应面优化结果表明,p H值为7.19、温度为32℃、摇床转速为185 rpm时硫氰酸盐降解率最高,硫氰酸盐降解率可达70%以上。基于RSA的结果,在最优条件下验证复合菌群可在24小时内使硫氰酸盐平均降解率为75.16%,30小时后降解率100%,证明了模型的可行性和准确性。研究结果表明复合菌群可降解硫氰酸盐、苯酚、喹啉、COD、吲哚和苯胺,36小时内的降解率分别为100%、99.36%、98.49%、96.37%、94.72%和98.58%,并且GC-MS结果表明复合菌群可降解废水中大多数有机物质,展现出复合菌群降解广谱性。(4)动力学研究结果表明,复合菌群降解硫氰酸盐符合底物抑制模型-Haldane方程,硫氰酸盐最大降解速率和复合菌群最大生长速率Vmax分别为0.14911 g·L-1h-1和0.23646 g·L-1h-1。此外,复合菌群在30小时内可完全降解41.24 m M硫氰酸盐,而原始活性污泥降解硫氰酸盐的效率仅为13.41%;复合菌群最大可耐受154.64 m M的硫氰酸盐,培养6天,降解率可达100%,SO42-和NH4+的生成量分别为121.52 m M和80.74 m M。(5)16S rRNA高通量测序结果表明,细菌多样性及结构在添加硫氰酸盐定向富集驯化后发生了改变,生物多样性在减少;活性污泥中的优势菌门主要有Proteobacteria、Acidobacteria、Bacteroidetes、Firmicutes和Planctomycetes,丰度分别为25.88%、57.97%、12.5%、1.32%和0.76%;复合菌群的优势菌门主要有Proteobacteria、Bacteroidetes、Patescibacteria、Armatimonadetes和WPS-2,丰度分别为81.07%、14.43%、1.8%、1.33%和0.76%。Uncultured_bacterium_f_Blastocatellaceae、Alicycliphilus、Diaphorobacter、uncultured_bacterium_f_NS9_marine_group、Thiobacillus和uncultured_bacterium_f_Mitochondria,为原始污泥样品中主要的菌属,丰度分别为57.97%、12.37%、2.79%、5.98%、2.69%和2.92%;而复合菌群样品中主要的菌属为Thiobacillus(77.78%)、uncultured_bacterium_f_Chitinophagaceae(6.15%)、uncultured_bacterium_f_NS9_marine_group(5.6%)、Dokdonella(2.07%)和uncultured_bacterium_f_Saccharimonadaceae(1.8%)。复合菌群中Thiobacillus丰度为77.78%,活性污泥中Thiobacillus丰度为2.69%,Thiobacillus从活性污泥中的劣势菌属变为复合菌群中的优势菌属,被认为是复合菌群降解硫氰酸盐的关键菌属。(6)植物毒理学研究结果表明,硫氰酸盐对水稻和绿豆种子发芽有抑制作用,41.24 m M的硫氰酸盐所发芽的绿豆和水稻种子的发芽率分别只能达到82%和76%,且发芽后的种子会坏死;经复合菌群降解后硫氰酸盐对植物影响不显著,种子发芽率100%,且在后期长势良好,明显优于原始污泥的解毒效果。复合菌群降解硫氰酸盐后培养的绿豆和水稻种子的GI(%)分别比未降解硫氰酸盐的绿豆和水稻种子提高94%和84.83%。(7)体外细胞毒理学检测结果表明,与蒸馏水组对照,41.24 m M硫氰酸盐培养基、活性污泥降解前期和后期以及复合菌群降解前期的培养液均显著抑制了Neuro-2a细胞活力、诱导Neuro-2a细胞ROS生成、提高Neuro-2a细胞钙离子浓度、破环Neuro-2a细胞的细胞核、促使Neuro-2a细胞凋亡、降低Neuro-2a细胞线粒体膜电位、增加了Neuro-2a细胞G1期细胞数量以及损伤Neuro-2a细胞DNA,而复合菌群降解硫氰酸盐后期培养液培养的Neuro-2a细胞与蒸馏水培养的细胞没有显著差异,复合菌群对硫氰酸盐有着很好的脱毒效果。
其他文献
随着工业化、城镇化发展,农村大量劳动力向城镇转移,在环境与资源的双重约束下,传统农业耕种方式难以维持农民可持续发展,农业科技推广应用是农业可持续发展的重要保证。然而,我国农业科技成果众多,但农业科技成果转化率和应用率并不理想,主要原因是农业科技成果创新与农业科技成果转化推广相脱节,农业产业技术需求与农业技术供给相脱节。基于此,本文以江西省水稻生产为例,从农户需求视角出发,分别从农技员指导和政府农技
学位
三农问题长期以来是政府关注的核心社会问题。乡村振兴靠产业,产业的振兴靠品牌。品牌强农,即是推进农产品区域公用品牌建设。苍南县深入推进农业品牌振兴,以塑造品牌、提高品质、拓宽渠道、产业融合、品牌运营及宣传推广等为发展方式,全力打造“苍农一品”农产品区域公用品牌整体形象。然而目前,品牌仍然处于发展的初级阶段,品牌知名度低,市场反响小,农产品品质和市场满意度波动较大。因此,研究如何进一步提高“苍农一品”
学位
紫鸭跖草(Setcreasea purpurea)是铜超积累植物,其耐受铜离子的能力强于其他普通植物,在修复铜污染的土地具有一定的潜力,说明其拥有强大的防御机制来抵御铜毒害。在研究紫鸭跖草在铜胁迫下的生理反应时,发现紫鸭跖草在铜胁迫下会诱导表达特异蛋白以增强对铜的耐受性。为深入探究紫鸭跖草的耐铜机制,实验室前期对紫鸭跖草根组织进行了转录组测序和TMT蛋白组学分析,分析发现紫鸭跖草SpCu/Zn-S
学位
如今,人类生存的环境面临着许多严重的环境污染问题。其中,水污染问题对生物和生态系统造成了危害。然而,一些有害的有机污染物如罗丹明B、亚甲基蓝、双酚A以及强力霉素、磺胺嘧啶、环丙沙星等抗生素不断被添加到水中,严重影响着水生生物和人类的安全。为了解决上述环境污染问题,研究者采用了物理、机械、化学、生物等多种常用方法,但是这些技术在成本效益和无害化方面还需要加强。因此,需要高效、无毒、低成本的技术来降解
学位
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的一种高致病性烈性猪传染病,唯一已知的DNA虫媒病毒。非洲猪瘟病毒由于其极强的传染性以及缺乏有效的疫苗,能够导致家猪和野猪的高的死亡率,对全球养猪业产生重大的经济影响。目前,我们对非洲猪瘟的认识尚不透彻,未有安全有效的疫苗产出。因此,进一步阐明ASFV基因功能
学位
赣南脐橙荣获“中华名果”等称号,是中国国家地理标志产品,已成为江西赣州农业的第一支柱产业。然而,黄龙病、衰退病等病害给脐橙产业造成极大的经济损失。因此,病害早期检测在果园防控中显得尤为重要,而传统的理化方法难以实现病害的快速检测。基于此,研究提出基于近红外光谱技术和高光谱图像技术的赣南脐橙典型病源光谱学快速无损检测方法。以健康、黄龙病、缺素和衰退病四类赣南脐橙新鲜叶片为研究对象,测定分析四类赣南脐
学位
甾体化合物具有很强的生理活性,是临床上重要的药物来源。微生物对甾体化合物的结构修饰作用,让一些转化产物展现出与底物不一样的生理活性,是潜在的新药发现途径。筛选出具有转化能力的菌株,并分离出有潜在药用价值的转化产物,对甾体药物的发展十分重要。本文从菌株的筛选、转化产物的鉴定及活性研究、转化条件的改进方面进行了研究。主要研究成果如下:1.本文以胆固醇为唯一碳源,从土壤中筛选出转化能力强的3株WHX13
学位
二氨基庚二酸脱羧酶(DAPDC)是PLP依赖型脱羧酶,特异性对二氨基庚二酸的D-立体中心的羧基进行脱羧作用,生成赖氨酸。本研究以蓝杆藻ATCC51142基因组为模板,PCR扩增获得cce1351基因,构建了pET28a-cce1351表达载体,转化进大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。进行诱导表达和纯化后,通过偶联酵母氨酸脱氢酶验证了cce1351蛋白具有二氨基庚二酸脱羧酶的功能,并对cce13
学位
水稻是我国种植面积最广的粮食作物,铝(aluminum,Al)毒被认为是酸性土壤中作物生产的主要限制因素。水稻的Al毒响应机理十分复杂。虽然目前已经有一些调控水稻解Al毒机制的基因被克隆,但是水稻的Al毒响应机制还未完全阐明。H570是超级杂交稻中浙优1号的父本,利用根相对伸长量(relative root elongation,RRE)判断其在苗期对Al毒敏感,因此,阐明其在Al毒胁迫下的基因表
学位
猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由于感染了猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)而引起的疾病,该病的主要症状包括呕吐、腹泻、厌食、脱水性下痢等。其致死率随着猪日龄的减小而增加,因此该病对于新生仔猪的致死率可以达到100%。自上世纪70年代首次分离出PEDV以来,该病毒已经严重打击了全球多个国家的养猪行
学位