紫斑牡丹胚培养研究

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本试验以紫斑牡丹的种胚为试材,选取胚龄分别为盛花后30 d、45 d、60 d、75 d的幼胚和盛花后120 d的成熟胚,研究了不同的基本培养基、不同的植物生长调节物质6-BA、IAA、NAA、TDZ及不同碳源和水解酪蛋白对不同成熟期种胚的萌发、继代增殖以及生根过程中的影响。主要研究结果如下:1.胚龄为盛花后30 d、45 d、60 d、75 d的幼胚在培养基(MS + 6-BA 1.0 mg/L + IAA 0.2 mg/L + 30 g/L蔗糖)培养30 d,萌发率分别为23.3 %、41.7 %、53.3 %、58.3 %,胚龄越大,萌发率越高;75 d胚龄的紫斑牡丹种子于4℃培养箱中低温预处理15 d,在同一培养基中培养30 d萌发率达68.3 %,低温预处理促进种胚萌发。2.胚龄为75 d的紫斑牡丹种子经4℃低温预处理15 d,在改良MS(微量3/2) + 6-BA 1.0 mg/L + IAA 0.2 mg/L + CH 0.3 g/L +蔗糖20 g/L +葡萄糖10 g/L上直接萌发成苗,萌发率、成苗率分别为100 %、98.3 %。3.成熟胚在MS、1/2MS培养基上可直接萌发成苗, MS上的生长情况好于1/2MS培养基的;大量元素对种胚的萌发有直接的作用,培养基中不添加大量元素时,种胚萌发率为0;成熟种胚在改良MS(微量3/2) + 6-BA 1.0 mg/L + IAA 0.2 mg/L + CH 0.3 g/L +蔗糖20 g/L +葡萄糖10 g/L培养基上培养,萌发率、成苗率分别为100 %、95 %。4.种胚苗继代时,单糖作碳源的效果好于混合糖作碳源;在单糖作碳源时,蔗糖优于葡萄糖;铁盐含量是影响紫斑牡丹试管苗株高的重要原因之一;TDZ和活性炭降低了继代苗的增殖倍数;紫斑牡丹试管苗在培养基(MS + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.01 mg/L +蔗糖30 g/L)上继代培养30 d,增殖倍数可达5.7。5.NAA不能使试管苗生根;低浓度的IBA和IAA单独加入培养基中,不能使试管苗生根,而混合使用有利于生根;低浓度的IAA + TDZ组合比IBA + TDZ组合生根率高;在1/2MS + TDZ 0.05 mg/L + IAA 0.1 mg/L + AC 2 g/L的培养基中诱导试管苗生根,30 d后生根率达26.68 %。
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