芜菁抗病种质创新的相关技术研究

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芜菁(Brassica campestris L. ssp. rapifera Sinsk, syn. B. rapa L. ssp. rapifera)是十字花科芸薹属芸薹种的一个亚种,在我国主要做蔬菜及饲料用,在浙江省温州地区有大量的栽培,但是由于栽培过程中芜菁病毒病的大量发生,使得芜菁的产量和品质受到了很大的影响。目前对病毒病还没有十分有效的方法进行防治,而且由于抗病种质资源的缺乏,使得常规的杂交育种等方法不能从根本上解决芜菁的病害问题。采用组织培养方法进行转基因遗传转化、利用雄性不育系进行杂种优势育种、以及分子标记辅助选择育种等育种技术,从芜菁抗病种质创新入手,将大大加速其抗病育种的进程。 本研究以芜菁品种(系)及甘蓝型油菜Ogura胞质雄性不育系等为研究材料,利用组织培养、常规回交育种以及混合群体分组法(BSA)结合AFLP多态性分析等技术方法,分别在‘温州盘菜’再生体系的构建、芜菁抗病Ogura雄性不育系及保持系选育、芜菁抗TuMV相关基因AFLP分析等方面开展工作,为芜菁抗病种质创新进行了初步研究。主要结果如下: (1)通过对不同浓度的激素配比、AgNO3浓度等的进行筛选,提出了适合‘温州盘菜’离体培养的最佳培养基配方(1/2 NH4+MS+BAP 4 mg·L-1+2,4-D 0.1 mg·L-1+AgNO3 5 mg.L-1+2%蔗糖+0.8%琼脂),其再生频率达到16.7%。 (2)通过常规杂交育种和回交选育的方法,将Ougra胞质雄性不育系甘蓝型油菜与芜菁自交系‘耐病98-1’进行杂交后,分别以‘耐病98-1’和‘白蔓菁’为轮回亲本进行多代回交,初步得到了3个性状优良、不育性稳定的芜菁抗病Ogura雄性不育系‘Ogu00-NB-NB-NB-NBA’、‘Ogu00-NB-MJ-MJ-NBA’和‘Ogu00-NB-MJ-MJ-MJA’及其保持系‘Ogu00-NB-NB-NB-NBB’、‘Ogu00-NB-MJ-MJ-NBB’和‘Ogu00-NB-MJ-MJ-MJB’。 (3)以抗TuMV的芜菁自交系‘耐病98-1’和对TuMV极其敏感的芜菁品种‘温州盘菜’为材料,构建F2抗性分离群体,采用BSA法构建抗病与感病两个极端基因 摘要池,利用AFLP方法对两个基因池进行分析,得到一些与抗TuMV基因相关的AFLP条带。
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