BCG、PPD对哮喘小鼠的肺部病理及CD4~+CD25~+调节性T细胞的影响

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目的:通过建立小鼠哮喘模型,以卡介苗(BCG)和结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)作干预因素,从而了解哮喘小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+ regulatory T cell ,CD4+CD25+Treg)和其它T细胞亚群数量的变化,以及BCG和PPD干预前后肺部的病理改变,从而为哮喘防治提供一些有价值的参考。方法:将36只6-8周龄的BALB/C小鼠随机分成A、B、C、D 4组,A组为BCG+BCG干预组,B组为BCG+PPD干预组,C组为哮喘模型组,每组各10只,D组6只为正常对照组。A、B两组于实验的第1天皮内注射BCG,每次0.1ml(104CFU/只)。于第25天,A组再皮内注射BCG一次,剂量同前;B组皮内注射PPD0.1ml(5IU);C组和D组以等量的生理盐水作对照。A、B、C三组均于实验第28天和42天两次腹腔注射致敏液0.2ml/只/次(0.08%OVA和液态铝各0.1ml混合液)。于第56、57、58三天将A、B、C三组小鼠放入容器内,雾化吸入1%OVA(卵清蛋白)进行激发。于第60天和67天分批各处死一半小鼠,取心脏血和肺、脾组织,分别以流式细胞仪进行T细胞亚群检测和肺脏、脾脏病理检测。结果:(1)T细胞亚群检测结果:A、B、C三组的CD3+、CD4+、CD8+T细胞的百分比以及CD4+/CD8+的比值均比D组(正常对照组)低(P<0.05)。其中A、B两组的CD3+T细胞百分比较C组增高(P<0.05),而A、B两组之间无显著性差异(P>0.05);而CD4+、CD8+T细胞百分比及CD4+/CD8+的比值,A、B、C三组之间的比较均无显著性差异(P>0.05)。(2)CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的百分比:其它三组低于D组(P<0.05),A、B两组较C组升高(P<0.05),而A、B两组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。(3)肺组织病理提示:D组基本没有嗜酸性粒细胞浸润,未见到粘液分泌;C组支气管壁可见大量嗜酸性粒细胞浸润,杯状细胞增生、变大,有大量粘液分泌;A、B两组与C组比较,嗜酸性粒细胞明显减少,杯状细胞减少,粘液分泌减少。B组气道的炎症反应轻于A组。结论:(1)支气管哮喘的发病与T细胞亚群功能紊乱有一定的关系。(2)CD4+CD25+Treg数量的减少,可能是导致哮喘发生的重要原因。(3)卡介苗单独应用或与PPD联合应用对哮喘都具有一定程度的预防作用,可以减轻哮喘小鼠的肺部炎症,提高CD4+CD25+Treg数量。BCG+PPD联合应用较BCG+BCG应用对哮喘的预防效果更明显。
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