骨肉瘤中MICA蛋白的表达及MMP9在MICA蛋白水解过程中作用的初步研究

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目的探讨:(1)骨肉瘤中MICA蛋白的表达及其临床病理意义。(2)骨肉瘤中MMP9在MICA蛋白水解过程中作用的初步研究。方法:(1)采用免疫组织化学法,检测39例良性骨肿瘤及40例骨肉瘤组织中MICA的表达,并结合性别、年肿瘤大小、分化程度等临床参数进行统计学分析。并且western-blot检测骨肉瘤细胞系中总蛋白及上清蛋白MICA表达。(2)zymography检测骨肉瘤细胞系上清蛋白中MMP2、MMP9表达,细胞培养基中加入MMP9 inhibitor I、MMP2/MMP9 inhibitor V再次行western-blot检测MICA及sMICA表达以探索MMP9在MICA蛋白水解中的作用。结果:(1) MICA蛋白于良性骨肿瘤及骨肉瘤中均有表达。MICA分子表现为浅黄、棕黄或褐色,定位于细胞胞质及胞膜。良性骨肿瘤及骨肉瘤MICA的表达强度有显著性差异(P<0.05),而MICA的表达强度在不同性别、年龄、肿瘤大小的组间比较则未见显著性差异(P>0.05)。良性骨肿瘤及骨肉瘤中MICA表达差异提示MICA参与了骨肉瘤的发生、发展过程。骨肉瘤细胞系总蛋白及上清蛋白中均有MICA表达,上清蛋白去糖基化后大小为33KD,符合MICA蛋白从α3区域蛋白水解的理论。(2)MMP2对骨肉瘤细胞MICA的蛋白水解过程无明显影响,而MMP9加强了MICA蛋白的蛋白水解作用,并可能介导了MICA的蛋白水解过程,在MICA蛋白水解介导的骨肉瘤免疫逃逸机制中起关键作用。
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