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目的:生物节律是自然界最普遍的现象,能使生物能更好地适应外界环境。人类血压具有昼夜节律特征,表现为昼高夜低型。异常的血压昼夜节律可增加心脏、脑、肾脏等脏器损害的风险,同时也增加脑出血、脑梗死、心肌梗死、心律失常等事件的发生率和死亡率。血压昼夜节律可受多种神经、体液因素的影响,其中肾素-血管紧张素-醛固酮系统(Reninangiotensin-aldosterone system,RAAS)发挥着重要作用。近年来研究提示,肾脏具有完善的局部RAAS,尿血管紧张素原(AGT)水平与肾内AGT、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)活性呈正相关,故尿液中AGT、AngⅡ、醛固酮等活性物质可能是反映肾内RAAS活性的重要指标。本研究通过收集自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rat,SHR)同日不同时间点(06:00,12:00,18:00,24:00)的尿液,探讨不同时间(早上或晚上)灌服螺内酯对SHR大鼠尿液中AGT、AngⅡ、醛固酮、肾素等活性物质水平及昼夜节律的影响。方法:30只健康清洁级10周龄雄性SHR大鼠(体质量:250-300克之间),于河北省人民医院动物中心喂养,在灌服螺内酯前先对SHR大鼠适应性喂养1周,使其适应周围环境。采用完全随机的方法将30只SHR大鼠随机分为早晨07:00灌服螺内酯组(M组)、晚上19:00灌服螺内酯组(N组)、灌服生理盐水对照组(C组),每组10只。M组、N组给予螺内酯20mg/Kg*d,C组给予等容积生理盐水每早一次灌服,按照此方案喂养8周。用无创鼠尾血压计分别于开始灌药前、灌药第4周、灌药第8周时测量三组SHR大鼠收缩压(Systolic blood pressure,SBP)。同时在灌药第8周时,称量各组SHR大鼠的体质量,并于同日24小时内不同时间点(06:00,12:00,18:00,24:00)收集各组SHR大鼠尿液,采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分别检测各组SHR大鼠尿液中AGT、AngⅡ、醛固酮、肾素的含量。尿液收集结束后分别处死各组大鼠,取出心脏,称取全心质量,然后分离出左心室称取左心室质量(Leftventricular mass,LVM),计算心重指数(Heart weight index,HWI)。应用方差分析比较各组之间AGT、AngⅡ、醛固酮、肾素的水平是否具有统计学差异(P<0.05)。应用余弦拟合法及零振幅检验(zero amplitude test)评价是否各上述指标存在昼夜节律。结果:1早灌服螺内酯组(M组)、晚灌服螺内酯组(N组)及对照组(C组)SHR大鼠尿中AGT、AngⅡ、醛固酮、肾素水平:M组和N组SHR大鼠尿中AGT、AngⅡ、醛固酮的24小时平均水平较C组降低,差异有统计学意义(P<0.01),而M组和N组之间差异无统计学意义(3指标比较分别为P=0.232,P=0.882,P=0.057);M组和N组SHR大鼠尿液中肾素的24小时平均水平较C组升高,差异有统计学意义(P<0.01),而M组和N组之间差异无统计学意义(P=0.347)。2灌服螺内酯前、灌服螺内酯4周时及8周时SHR大鼠收缩压水平:灌服螺内酯前,三组SHR大鼠收缩压水平无显著差异(P>0.05);灌药第4周、8周时,M组和N组SHR大鼠收缩压较C组显著下降(P<0.01),而M组和N组间的差异无统计学意义(4周与8周比较时分别为P=0.142,P=0.154)。3三组SHR大鼠LVM及HWI水平:M组和N组SHR大鼠的LVM、HWI较C组明显降低(P<0.01),而M组和N组间无显著差异(2指标比较分别为P=0.247,P=0.822)。4三组SHR大鼠尿中AGT、AngⅡ、醛固酮、肾素等活性物质的时间生物学特征:M、N、C三组SHR大鼠尿中RAAS各指标均呈现出昼夜节律特征。C组SHR大鼠尿中AGT、AngⅡ、醛固酮、肾素峰值依次出现在00:36、07:46、02:11、07:05;M组上述各指标的峰值依次出现在03:12、08:55、03:05、12:07;N组上述各指标的峰值依次出现在06:03、10:13、03:43、19:24,与C组相比,M组、N组各观察指标峰值出现时间延后,且N组峰值出现的时间较M组延后。结论:1与对照组相比,早灌服螺内酯组与晚灌服螺内酯组SHR大鼠尿中肾素平均浓度升高,而AGT、AngⅡ、醛固酮平均浓度均降低。2早晚不同时间灌服螺内酯均可以降低SHR大鼠收缩压,早、晚不同时间灌服螺内酯对收缩压的影响无明显差别。3早晚不同时间灌服螺内酯均可以降低SHR大鼠的LVM及HWI。4早晚灌服螺内酯组与对照组SHR大鼠尿中AGT、AngⅡ、醛固酮、肾素浓度均能呈现出典型的昼夜节律特征。在一定程度上,早晚不同时间灌服螺内酯均可使上述各个指标节律峰值延后,与早晨灌服螺内酯组相比,晚间灌服螺内酯组SHR大鼠尿中各指标节律峰值出现的时间延后。提示早晚不同时间灌服螺内酯可影响SHR大鼠尿中RAAS各活性成分的时间生物学特征。