用于肿瘤治疗的不同形貌的聚醚—聚酯胶束的研究

来源 :西南交通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:humeiyu2009
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纳米载体在体内循环中的迅速清除目前仍是肿瘤治疗中面临的一大挑战。受到自然界中一些具有不对称形貌的病毒和细菌病原体对特异性的细胞具有很强的感染能力,尤其是一些杆状病毒如革兰氏阴性菌沙门菌和革兰氏阳性菌李斯特菌能够进入哺乳动物细胞中的启发,考虑将纳米载体制备成类似于细菌病原体的形貌,从而能够更好的应用于药物传递领域。在本论文中,我们通过在mPEG-CL41聚醚-聚酯共聚物胶束制备过程中,加入一系列不同浓度的盐溶液,制备出不同形貌的胶束,通过原子力显微镜AFM、透射电镜TEM和激光共聚焦显微镜CLSM等对其形貌进行表征。选择类似杆状细菌病原体结构的两种不同长度的棒状胶束:短棒状SR和长棒状LR,并以球形形貌的胶束S作对照,用纳米激光粒度仪DLS考察其在0.9%生理盐水中随时间变化的稳定性。在所考察的120h内,三种形貌的胶束的平均粒径和粒径分布均没有明显变化,说明其稳定性很好。选用抗癌药物阿霉素作为药物模型,长棒状胶束的载药量达到8.4%,短棒状和球形依次为7.3%和4.5%。体外模拟药物释放结果显示,在酸性条件下,棒状胶束能够实现药物快速稳定的释放。然后,对三种不同形貌的载药胶束进行系列体外生物学评价,结果表明:聚醚-聚酯载体材料具有良好的生物相容性;三种不同形貌的载药胶束均能抑制肿瘤细胞HeLa/HepG2的增殖,并能诱导细胞发生凋亡,以短棒状载药胶束组的抑制效果最佳;在细胞的吞噬研究中,发现棒状胶束相比球形胶束更容易被我们所研究的两种肿瘤细胞HeLa/HepG2所摄取,并且从TEM超薄切片中发现胶束通过内在化方式进入细胞后形貌仍然保持完整,说明细胞内在化过程对胶束的形貌不会产生影响;考察细胞对不同形貌胶束的内在化机理发现:(1)同一种形貌的胶束在不同种类的细胞中,其内在化方式不完全相同;(2)同一种细胞中,不同形貌的胶束的内在化方式也不尽相同;(3)细胞对同一种形貌的胶束的内在化方式并不是唯一的,胶束进入细胞可能是多种内在化方式协同作用的结果。最后,在Balb/c小鼠皮下建立小鼠肝癌细胞H22肿瘤模型,通过尾静脉注射三种不同形貌的载药胶束,进行体内实验:药物血液清除曲线和药代动力学参数表明长棒状的载药胶束显著延长了药物在血液中的循环时间;药物体内分布显示,长棒状胶束显著增加药物在肿瘤部位的富集量,减少在正常组织的聚集浓度;另外,考察21天治疗期内小鼠体重、肿瘤体积和肿瘤重量变化来研究体内抗肿瘤效果,均发现:长棒状载药胶束组具有最高的安全性及最佳的抗肿瘤效果。TUNEL组织学染色分析也表明,该组的肿瘤细胞凋亡特征最明显,凋亡率也最高,进一步从组织学水平证实了其抑瘤效果最佳。
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