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目的：探讨细胞外信号调节激酶2(extracellular signal regulated kinase 2，ERK2)对肾小管上皮细胞向间充质转化的调控效应；建立大鼠肾移植模型，探讨腺病毒介导的反义ERK2(Adenovirus-mediated antisense ERK2，Adanti-ERK2)对大鼠移植肾肾病的延缓作用。方法：(1)构建反义ERK2腺病毒载体Adanti-ERK2及对照病毒Ad-LacZ。(2)以结缔组织生长因子(connective tissue growth factor，CTGF)刺激肾小管上皮细胞，观测肾小管上皮细胞表型变化及ERK2蛋白表达情况。(3)Adanti-ERK2按不同转染强度(multiplicity of infection，MOI)转染肾小管上皮细胞，确定最适转染强度。按干预因素不同将肾小管上皮细胞分为对照组(无干预因素)、Ad-LacZ组(最适MOI的Ad-LacZ)、CTGF组(加入终浓度为5ng／ml的CTGF)和Adanti-ERK2组(加入终浓度为5ng／ml的CTGF和最适MOI的Adanti-ERK2)。将肾小管上皮细胞培养72h后，细胞免疫化学法检测各组上皮细胞表型蛋白E-Cadherin和间充质细胞表型蛋白Vimentin、α-SMA的表达，Western blot法检测各组ERK2蛋白的表达；Boyden小室在第一、三和第五天检测各组肾小管上皮细胞迁移能力的变化。(4)建立Fisher344大鼠至Lewis大鼠的慢性移植肾肾病(chronic allograft nephropathy，CAN)模型。按不同干预因素将受体大鼠分为对照组、Ad-LacZ组和Adanti-ERK2组。在移植前，对照组供肾给予HTK液灌注；Ad-LacZ组给予含有1×10~9pfu Ad-LacZ的HTK液灌注；Adanti-ERK2组给予含有1×10~9pfu Adanti-ERK2的HTK液灌注。在移植术后24周，取移植肾脏进行病理学观察；免疫组织化学法检测肾小管上皮细胞E-Cadherin、Vimentin、α-SMA和TβRI的表达以及CD4~+T、CD8~+T、ED-1~+细胞的间质浸润情况；ELISA法检测血清中TGF-β1的含量。结果：(1)成功地构建了反义ERK2和LacZ腺病毒载体。(2)肾小管上皮细胞在CTGF刺激72h后，上皮细胞表型E-Cadherin表达减少，而间充质细胞表型蛋白Vimentin和α-SMA表达增加，肾小管上皮细胞在CTGF的作用下转化为间充质细胞。在CTGF刺激肾小管上皮细胞表型转化过程中伴随有ERK2蛋白的表达上调。(3)与MOI为50和200相比较，腺病毒载体以转染强度100转染肾小管上皮细胞2天后，有95％的细胞表达绿色荧光；并且在转染后第一天和第二天，细胞存活率与对照组和MOI 50组无显著差异，确定最适MOI值为100。(4)Adanti-ERK2组以Adanti-ERK2(MOI 100)转染组肾小管上皮细胞后，在CTGF刺激下其上皮细胞表型蛋白E-Cadherin表达较对照组未发生明显的变化，Vimentin和α-SMA的表达较CTGF组明显减少；同时伴有ERK2蛋白表达的下调。(5)Boyden小室检测发现，各组细胞在第一天迁移至滤膜对侧的细胞数目无差异；在第三天CTGF组细胞迁移数开始高于其他三组；在第五天迁移出细胞数明显高于其他各组(CTGF组VS对照组，Ad-LacZ组和Adanti-ERK2组：45．1±1．9 VS12．7±1．4，11．6±1．7和14．6±1．6；P＜0．05)，而Adanti-ERK2组与对照组和Ad-LacZ组间差异无统计学意义(Adanti-ERK2组VS对照组：14．6±1．6 VS 12．7±1．4，P＞0．05；Adanti-ERK2组VSAd-LacZ组：14．6±1．6 VS 11．6±1．7，P＞0．05)。(6)大鼠肾移植受体鼠在移植术后24周，对照组和Ad-LacZ组移植肾呈现典型的CAN表现，间质中CD4~+T、CD8~+T和ED-1~+细胞的浸润明显。在Adanti-ERK2组移植肾肾小球硬化不明显，间质纤维化病变轻微，间质内有少量CD4~+T、CD8~+T、ED-1~+细胞的浸润。(7)在受体鼠移植术后24周，对照组和Ad-LacZ组移植肾病变区，肾小管上皮细胞E-Cadherin表达减少(对照组VS Adanti-ERK2组：71．6±6．1 VS 160．7±11．1；P＜0．05)肾间质内Vimentin(对照组VS Adanti-ERK2组：110．3±7．2 VS 47．8±6．5；P＜0．05)和α-SMA表达显著增多。Adanti-ERK2组移植肾小管上皮细胞E-Cadherin表达基本正常，Vimentin和α-SMA表达未见明显的增多。(8)在移植术后24周，对照组和Ad-LacZ组血清中TGF-β1含量明显高于Adanti-ERK2组，同时移植肾组织中伴有TβR I(对照组VSAdanti-ERK2组：146．4±10．2 VS 82．6±6．5；P＜0．05)表达增加。结论：肾小管上皮细胞通过上皮—间充质转化途径增加了肌成纤维细胞的来源，其对移植肾术后纤维化的进程有着重要的意义。在体外，CTGF可以诱导肾小管上皮细胞发生向间充质细胞转化，以腺病毒介导的反义ERK2基因治疗可以有效地阻断CTGF诱导的肾小管上皮细胞向间充质细胞转化；ERK2信号转导通路对CTGF诱导的肾小管上皮-间充质转化有调控作用。在体内以腺病毒介导的反义ERK2的基因治疗可以延缓移植肾肾病的进展，对移植肾具有保护作用。这种保护机制可能与减少炎性细胞的浸润、下调TGF-β1等致纤维化因子及其受体的表达以及抑制肾小管上皮细胞向间充质细胞的转化有关。针对ERK2信号转导通路的基因治疗为防治肾脏纤维化提供可能的新的治疗靶点。