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目的：1.研究中国部分汉族、新疆维族和西藏藏族人群RhD阴性表型分布特征。2.研究中国部分汉族和新疆维族人群DEL型Rh表型分布特征及其与RhC/c抗原的相关性。3.比较研究中国部分汉族和新疆维族人群DEL型基因结构和遗传特点,探讨DEL型遗传多态性与D抗原表达量之间的关系。4.探索中国部分汉族和新疆维族人群DEL型常见突变类型及基因组合情况,分析其与RhC抗原的相关性,建立中国人常见DEL型的分子检测方法。5.为国际数据库提供中国人DEL型遗传多态性的信息资料。方法：1.分别采用抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e单克隆抗体鉴定Rh表型；用RhD(IgM)单克隆抗体检测为RhD阴性者用改良间接抗球蛋白试验(Indirect antiglobulin test, IAT)确认；确认为RhD阴性者用吸收放散试验(微柱凝胶法)检测DEL型。2.针对RHD基因1227位点设计序列特异性引物,用聚合酶链反应-序列特异性引物技术(Polymerase Chain Reaction-Sequnence Specific Primer, PCR-SSP)对RHD基因1227位点进行检测,并用测序方法进行验证。3.针对RHD基因外显子9特异性序列位点,应用PCR技术对RHD基因外显子9进行检测,并用测序方法进行验证。4.应用PCR-SSP方法检测RHD基因的上游、下游和杂合的Rhesus盒(Rhesus box),并对部分样本测序验证。5.采用SPSS18.0统计软件对研究数据进行统计分析处理。结果：1.222例随机非血缘关系汉族RhD阴性样本共检出CCee (4.95%)、Ccee (31.08%)、ccEE (0.90%)、ccEe (4.06%)、ccee (56.76%)和CcEe(2.25%)6种表型；55例随机非血缘关系新疆维族RhD阴性样本共检出CCee (5.45%)、Ccee(3.64%)和ccee (90.91%)3种表型。汉族、维族和藏族RhD阴性者Rh表型分布存在统计学差异(χ2=17.04,P=0.000)；汉族和维族、维族和藏族RhD阴性样本Rh表型分布有统计学差异(χ2=25.031, P’=0.000; x2=21.761, P’=0.000),汉族和藏族RhD阴性样本Rh表型分布无统计学差异(x2=1.337,P’=0.720)；汉族和维族RhD阴性样本在Cc表型分布方面也存在统计学差异(χ2=19.757,P=0.000)。2.222例随机非血缘关系汉族RhD阴性样本中Cc、CC和cc表型者分别为74例、11例和137例。经吸收放散试验,上述3种表型分别检出DEL型样本36(83.72%)例、4(9.30%)例、3(6.98%)例,共43例,占RhD阴性样本的19.37%；55例随机非血缘关系维族RhD阴性样本中Cc、CC和cc表型者分别有2例、3例和50例,只在CC表型者中检出1例DEL型；7例西藏藏族RhD阴性样本中均未检测到DEL型。3.222例随机非血缘关系汉族RhD阴性样本中,只检测到RHD基因的杂合box(即RHD基因型为RHD-/RHD-)的样本有157例(70.72%),同时检测到上、下游和杂合box(即RHD基因型为RHD+/RHD-)的样本有60例(27.03%),检测到上游和下游box(即RHD基因型为RHD+/RHD+)的样本有5例(2.25%6)；55例随机非血缘关系新疆维族RhD阴性样本中,54例(98.18%)样本只检测到RHD基因的杂合box,1例样本检测到RHD基因的上、下游box；7例藏族样本中,6例样本(85.71%)只检测到RHD基因的杂合box,1例样本同时检测到RHD基因的上、下游和杂合box。此三个民族RHD基因型总体分布存在统计学差异(F=27.389,P=0.000)；汉族和维族RhD阴性样本RHD基因型分布差异有统计学意义(F=26.808,P=0.000),汉族和藏族之间无统计学差异(F=0.816,P=0.242)。RHD-/RHD-基因型比较,汉族和维族之间有统计学差异(χ2=18.315,P=0.000)。4.10例汉族弱D型样本均能检测到RHD基因的上、下游和杂合box；43例汉族DEL型样本中,39例样本均能检测到RHD基因的上、下游和杂合box,4例样本只检测到RHD基因的上、下游box；1例维族DEL型样本检测到上、下游box。使用PCR-SSP方法对43例随机非血缘关系中国汉族DEL型样本RHD基因1227位点检测,检测出1例为1227G、3例为12276/A和39例为1227A,结合Rhesus box检测结果,其基因组合情况分别为RHD1227G/-、RHD1227G/A、RHD1227A/-和HD1227A/A;1例随机非血缘关系新疆维族DEL型样本RHD基因1227位点检测为1227A,基因型为RHD1227A/A。所有RHD-/RHD-纯合子样本均未检测到RHD基因1227位点。40例(93.02%%)吸收放散试验为DEL型,等位基因为RHD1227A或A/G个体均携带C抗原。结论：1.中国汉族、藏族和维族RhD阴性人群Rh表型分布存在明显差异,尽管都以ccee表型为主,但维族ccee表型频率明显高于汉族人群,且这两民族在Cc表型分布方面也存在明显差异。2.中国汉族、新疆维族和西藏藏族RhD阴性人群RHD基因型主要为RHD-/RHD-纯合子；汉族DEL型人群RHD基因型绝大部分是RHD+/RHD杂合子,都存在RHD基因。3.中国汉族和维族DEL型等位基因以RHD1227A为主,且与C抗原相关联。4.本研究建立了中国人DEL型基因检测方法,有助于研究中国人DEL型遗传学特征。