高咖啡碱含量的茶树特异种质资源筛选及SSR标记初步研究

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咖啡碱是影响茶叶质量的一个重要因素,是茶叶具有生理活性和广阔用途的最关键成分之一。咖啡碱在不同茶树品种新梢的含量一般为2%-5%,咖啡碱含量超过5%的种质资源称为高咖啡碱含量的种质资源。高咖啡碱含量(>5%)的资源,一方面,可作为茶树遗传改良的重要资源;另一方面,可应用于生产,从茶树鲜叶中直接大量提取咖啡碱或作为高咖啡碱茶叶加工原料。本研究以425份种质资源为试验材料,根据已有资料初步筛选出45份资源。分析这45份资源的生化成分,筛选高咖啡碱含量的茶树特异种质资源,同时进行了茶树高咖啡碱SSR标记的初步研究。本研究的主要结果如下:1、分析检测45份茶树资源春梢的生化成分含量。结果表明:茶树咖啡碱含量与氨基酸含量、茶多酚含量间无线性关系;咖啡碱含量高于5%的资源有3份,为Q20、Q41、Q45。它们的咖啡碱含量分别为5.10%、5.19%、5.46%,茶多酚的含量分别为30.50%、21.70%、28.19%,氨基酸分别为3.60%、3.40%、2.53%。它们为超常规水平的高咖啡碱茶树特异资源,可作为品质遗传改良或应用于提取咖啡碱的重要材料。在筛选过程中,也发现咖啡碱含量低于2%的资源2份,Q33、Q38。它们的咖啡碱含量分别为0.21%、1.12%,茶多酚含量分别为35.16%、30.23%,氨基酸含量分别为0.72%、0.46%。2、分析检测45份资源的春梢、夏梢、秋梢咖啡碱含量。结果表明:新梢咖啡碱含量在不同资源间差异很大;春梢、夏梢、秋梢的咖啡碱含量变化范围分别为0.21%-5.46%、0.84%-6.41、1.16%-5.70%,春、夏、秋平均值为3.99%、4.33%、4.19%,变异系数分别为3.99%、13.79%、10.90%。同一资源新梢的咖啡碱含量呈季节性变化,大多数(占57.78%)表现为:夏梢>秋梢>春梢。其中,Q20、Q45的新梢三季咖啡碱含量超过5%。此外,本试验结果还发现三季咖啡碱含量低于2%的资源2份,为Q33、Q38。3、从45份资源的中筛选出高咖啡碱资源(>5%)3份,分别为Q20、Q41、Q45;低咖啡碱资源(<2%)2份,分别为Q33、Q38;选取一般资源(咖啡碱2%-5%)5份,分别为Q2、Q28、Q7、Q29、Q15。采用植物基因组DNA提取试剂盒法提取茶树基因组DNA,用29对SSR引物对这三组材料进行SSR扩增。经过反复扩增,发现与茶树高咖啡碱有关的SSR标记ccmp3-1、ccmp3-2。
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