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压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)与盆腔器官脱垂(pelvic organ prolapse, POP)均属于女性盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfunction,PFD),主要发生于中老年妇女,随着年龄的增长其发病率逐年升高。国际尿控协会(international continence society, ICS)将SUI定义为膀胱内压超过最大尿道压时,在缺乏逼尿肌收缩的情况下出现的卫生学和社会学所不能接受的不自觉漏尿,且影响患者的生活质量。其特点是在正常状态下无遗尿,尿液的流出不是因为膀胱逼尿肌的收缩引起的。压力性尿失禁的发病率较高,在45～65岁的女性中患病率10%-27%,大样本流行病学调查显示12.5%妇女患有SUI,SUI和POP常常相伴发生,有研究发现约80%的SUI患者伴有POP,而约69%的POP患者伴有SUI,据此我们推测两者可能有共同的发病机制。压力性尿失禁的发病机制并不十分明确,1993年提出的“整体理论”和“吊床学说”被广大研究者接受,并开始了分子生物学方面的研究。盆底支持组织主要由韧带和筋膜组成,而这些结缔组织主要由胶原组成,多项研究表明,SUI患者盆底结缔组织中总胶原蛋白含量下降,可能是由于胶原降解增加所致,基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMPs)作为一种重要的细胞外基质降解酶,可降解盆底支持组织胶原,使盆底结构松弛。目前已发现20余种六大类MMPs,其中MMP-13属于胶原酶,可以水解Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型胶原、明胶和基底膜成分(包括基底膜蛋白多糖、粘蛋白等),MMP-14属于膜型基质金属蛋白酶,具有多种生物学功能,可作用于多种细胞外基质成分、细胞粘附分子和其他MMPs,直接和间接的参与许多重要的生理和病理过程。体外实验发现,MMP-13可以被MMP-14分段水解除去前肽区而被激活,发挥降解细胞外基质的作用。组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinase, TIMPs)是一个分泌性蛋白家族,主要通过以1：1的摩尔比例同MMPs结合形成MMPs-TIMPs复合体,从而阻断MMPs和底物结合,形成体内调节MMPs的内生性系统。有四种亚型,其中TIMP-1广泛存在于组织和体液中,可和几乎所有的MMPs家族成员形成复合物以抑制MMPs的活化。目的通过检测SUI组、POP组和对照组中MMP-13、MMP-14、TIMP-1的表达水平,并进行各指标间的相关性分析,探讨这些因子是否参与了SUI的发生,从而更深一步探讨SUI的发病机制。材料与方法1材料选取2008年7月～2009年1月在郑州大学第三附属医院妇科手术治疗的压力性尿失禁患者30例(SUI组),盆底器官脱垂患者30例(POP组),选择同期非雌激素相关疾病患者30例作对照观察(对照组)。SUI组入选条件：根据病史和各项检查确诊为SUI,妇科检查没有盆腔器官脱垂。POP组入选条件：无尿失禁症状,各项检查证实无尿失禁,妇科检查均有中度或重度阴道前壁膨出。对照组入选条件：无尿失禁症状,检查证实无尿失禁；妇科检查无阴道前壁膨出或子宫脱垂；术后病理证实为非雌激素相关疾病。所有入选病人术前6个月内均未服用过雌激素类药物,盆底的神经功能正常,尿常规分析无尿路感染。SUI组采用经阴道经闭孔无张力尿道中段悬吊(trans-obturator vaginal tape, TVT-O)术、改良的TVT-O术或者阴道前壁修补术等,POP组采用前盆底悬吊术或阴道前壁修补术,正常组采用阴式或者腹式子宫全切术,均取患者阴道前壁12点处组织。2方法采用免疫组织化学S-P法,严格按照试剂盒说明书方法染色,检测三组阴道壁组织中MMP-13、MMP-14和TIMP-1的表达情况。3结果判定和图像分析显微镜下仔细观察,阴道壁粘膜下结缔组织细胞胞浆或者胞膜出现黄色-棕黄色-棕褐色颗粒沉着为阳性细胞,MMP-13和TIMP-1主要定位于胞浆,MMP-14主要定位于胞浆和部分胞膜。全面观察每张切片,随机选取5个具有代表意义的高倍视野(10×40),采用Image-Pro Plus 6.1免疫组化定量分析软件计算每一视野中免疫组化阳性表达的累计光密度值(IOD)。4统计学分析所有数据应用Excel 2003录入建立数据库,各组数据的累计光密度值均以x±s表示,应用SPSS15.0软件包进行统计分析。计量资料三组间比较采用单因素方差分析,组间两两进一步比较用LSD-t检验,各指标间相关性分析采用Pearson相关分析。各种检验方法均以α=0.05为检验水准。结果1 MMP-13在阴道壁组织中的表达MMP-13在3组阴道壁组织中均可见表达,在SUI组与POP组的表达强于对照组。SUI组、POP组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),SUI组与POP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2 MMP-14在阴道壁组织中的表达MMP-14在3组阴道壁组织中均可见表达,在SUI组与POP组的表达强于对照组。SUI组、POP组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),SUI组与POP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。3 TIMP-1在阴道壁组织中的表达TIMP-1在3组阴道壁组织中均可见表达,在SUI组与POP组的表达低于对照组。SUI组、POP组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),SUI组与POP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。4 SUI组阴道壁组织中MMP-13、MMP-14、TIMP-1的相关性分析对SUI组阴道壁组织中MMP-13与MMP-14表达的累计光密度进行相关性分析,结果示：两者之间呈显著正相关(r=0.914,P<0.05)。对SUI组阴道壁组织中MMP-13与TIMP-1表达的累计光密度进行相关性分析,结果示：两者之间呈显著负相关(r=-0.844,P<0.05)。MMP-14与TIMP-1的表达呈显著负相关(r=-0.782,P<0.05)。结论1 SUI患者阴道壁组织中TIMP-1的表达降低,提示了TIMP-1作为MMP-13和MMP-14的抑制剂参与了SUI的发生。2 SUI患者阴道壁组织中MMP-14与MMP-13表达成正相关,MMP-14可能通过激活MMP-13,并且MMP-13和MMP-14表达增强,共同参与了SUI的发生。