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本文以唐鱼为实验动物,Vtg为检测指标,利用Native-PAGE电泳、唐鱼Vtg特异性脂蛋白染色和间接酶联免疫吸附(ELISA)3种技术检测了17β-雌二醇(E2)、壬基酚(NP)、多氯联苯(PCB)(Aroclor1248)、Cd2+、Zn2+及其混合物对唐鱼的雌激素效应。还测定了唐鱼在不同浓度的上述物质中暴露7、14d后超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性的变化,14d暴露后体长、体重的变化,以及E230d暴露后肝脏、精巢组织结构的改变,以评价内分泌干扰物长期暴露对唐鱼抗氧化系统和生长发育的影响。
Native-PAGE结果显示10μg/L、50μg/L E2水体暴露7、14d均诱导雄性唐鱼体内合成了Vtg,E2对唐鱼的雌激素效应具有时间累积效应,并随浓度升高而增强。ELISA检测表明0.1μg/L、0.5μg/L、1μg/L E27、14d和200μg/L、300μg/L NP14d暴露也使唐鱼合成了Vtg。NP、Cd2+、Zn2+与不同浓度的E2联合雌激素效应不同于单一毒物的雌激素效应,NP与E2表现为协同促进作用,其它几种物质的联合雌激素效应作用机制有待进一步的定量分析研究。
内分泌干扰物对唐鱼的抗氧化系统有明显影响,低浓度E2处理唐鱼7d可诱导SOD活性显著上升,时间延长、浓度升高时SOD活性无明显变化;低浓度NP对SOD活性没有明显的影响,高浓度NP使SOD活性极显著上升;中高浓度组PCB处理7、14d,低浓度组PCB处理14d时SOD活性被抑制,抑制程度随着时间的延长和浓度的升高有增强的趋势。实验中设置Cd2+、Zn2+浓度组基本都对唐鱼体内的SOD活性产生了一定的抑制作用,随着时间的延长,抑制程度加深。E2、NP、PCB、Cd2+、Zn2+单独作用时的SOD活性与各实验组的浓度之间都存在良好的剂量—效应关系。联合毒物实验与单一毒物实验的比较表明,联合效应与暴露时间和(或)各物质浓度有关,不是单独暴露效应的简单相加,大部分表现为毒性增强。
成年雄性唐鱼在不同浓度的E2、NP、PCB、Cd2+、Zn2+及其混合物中暴露7、14d后体长、体重未发生明显变化,经50μg/L的E2诱导30d后肝脏细胞略微增大,细胞排列疏松,精巢萎缩,生精细胞减少,进一步证明了环境雌激素能够诱导鱼类Vtg合成,并造成生殖系统的损伤。