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目的:观察芪蓝颗粒干预大鼠舌黏膜癌变模型,通过对大鼠癌变过程中Survivin基因及其蛋白、Bcl-2蛋白和p53蛋白表达的检测,了解这些细胞凋亡调控基因与口腔癌变过程的关系以及芪蓝颗粒在阻癌抑癌过程中对上述基因及蛋白的影响,从而揭示该制剂在阻癌抑癌的分子生物学机理,为临床应用提供实验依据。方法:选用SD大鼠150只,随机分为癌变模型组(A组),低剂量中药干预组(B组),中剂量中药干预组(C组),高剂量中药干预组(D组)以及正常对照组(E组),以0.002%的4 -硝基喹啉- 1 -氧化物(4-nitro-quinoline 1-oxide, 4NQO)饮水喂养制备大鼠舌癌变模型,同时采用芪蓝颗粒干预癌变过程,分别于9、18、27、36周分批处死7只大鼠,观察其舌组织病理变化并观察癌前损害和癌的发生率。采用逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)方法检测舌组织中Survivin mRNA的表达,采用免疫组织化学二步法检测Survivin、Bcl-2、P53蛋白的表达变化,并对实验结果进行统计分析。结果:1. B、C、D组大鼠的皮毛色白有光泽,活泼好动;而A组大鼠皮毛色黄粗糙,倦怠嗜睡,且逐渐消瘦,体重较同期其它各组大鼠轻(P <0.01)。2. 9、18周时, A、B、C、D组的癌变程度无统计学差异( P > 0.05);在27、36周时, A、B、C、D组的癌变有统计学意义(P <0.05)。在饮用4NQO的各组中, B、C、D组的癌变率均低于A组(P <0.05),其中以C组的癌变率最低。3.(1)A组中Survivin mRNA表达的强度:舌癌组织(0.684±0.311)>异常增生组织(0.341±0.306)>正常组织(0.034±0.073)(P均< 0.05);(2)A组中Survivin蛋白:舌癌组织>异常增生组织>正常组织(P < 0.05);(3)A组中Bcl-2和p53蛋白:舌癌组织>异常增生组织>正常组织(P < 0.05)。4. A组中Survivin蛋白表达与Bcl-2蛋白表达呈正相关(r = 0.699,P <0.001),Survivin蛋白表达与p53蛋白表达也呈正相关(P =0.001,r =0.419)。5.(1)舌癌组织中A组Survivin mRNA的表达(0.684±0.311)明显高于B(0.250±0.307)、C(0.016±0)、D(0.222±0.441)组(P < 0.05)。异常增生组织中A组Survivin mRNA的表达(0.341±0.306)明显高于B(0.132±0.174)、C(0.116±0.167)、D(0.133±0.181)组(P < 0.05)。(2)舌癌组织中A组Survivin蛋白表达强度明显高于中药干预组各组(P < 0.05),异常增生组织中A组Survivin蛋白表达强度高于中药干预组各组(P < 0.05)。(3)舌癌组织中A组Bcl-2蛋白和p53蛋白阳性表达与中药干预组之间无明显统计学差异(P > 0.05),异常增生舌组织中A组Bcl-2和p53蛋白表达明显高于中药干预组各组(P < 0.05)。结论:1.中药干预组各组体重较A组重,说明芪蓝颗粒具有扶正固本的功效。2. Survivin mRNA和Survivin蛋白的表达呈现舌癌>异常增生>正常黏膜,表明Survivin基因参与了舌癌的发生及发展。Bcl-2、p53蛋白随癌变程度增加而增加,表明Bcl-2、p53蛋白与舌癌的发生及发展有关。3. Survivin mRNA和Survivin蛋白表达的实验结果表明:免疫组化二步法与RT-PCR法具有一致性,由于免疫组化对实验设备要求不高,费用相对较低,可以通过这种方法对目的基因进行初步检测。4. Survivin蛋白与Bcl-2蛋白、p53蛋白呈正相关,表明Survivin、Bcl-2、p53蛋白在舌癌的发生、发展过程中具有协同作用。5.芪蓝颗粒能明显降低舌黏膜异常增生和癌的发生率,延缓舌癌变进程,对实验性口腔黏膜癌变具有明显的阻癌、抑癌作用。6.芪蓝颗粒阻癌的机制可能是,在异常增生阶段通过下调Survivin、Bcl-2和p53蛋白的表达起到阻断癌变的作用,而在癌组织中通过下调Survivin的表达起到抑制癌症的作用。