抗菌肽是一类普遍存在于各类生物体中的小分子多肽，具有广谱抗菌活性，且不易产生细菌耐药性，被视为未来抗生素的有效替代品。在前期研究中，本实验室利用基因工程技术获得了毕赤酵母表达的大黄鱼（Pseudosciaena crocea）抗菌肽Hepcidin基因工程表达产品Pc-hepc，并以Pc-hepc作为饲料添加剂饲喂海水养殖鱼类黑鲷(Acanthopagrus schlegelii)，进行为期一年的环境释放试验，本项研究运用生物学技术对Pc-hepc的应用进行了系统的安全性评价研究，获得了一年应用Pc-hepc的环境释放试验数据，为基因工程产品Pc-hepc在海水养殖业的开发利用奠定了基础。主要研究成果如下:　　1.发现长期饲喂Pc-hepc不会影响黑鲷的正常生长。饲料中添加Pc-hepc饲喂黑鲷，为期一年，期间每隔两周时间随机测量对照组和实验组黑鲷的体重与体长，统计黑鲷体长与体重随投喂时间的变化趋势。结果显示，实验组黑鲷比对照组有一定的生长优势，表明饲喂抗菌肽Pc-hepc不会影响黑鲷的正常生长，甚至在一定程度上还会促进黑鲷的生长。　　2.长期饲喂Pc-hepc不会引起黑鲷肝脏和肠道的组织形态变化。每隔两周时间随机采取对照组和实验组黑鲷的肝脏和肠道，制作两种组织的石蜡切片，进行H&E染色。显微镜观察黑鲷肝脏和肠道的生理结构和细胞形态，发现实验组肠道切片中的内壁和间质形态正常，小肠绒毛排列整齐、分布均匀，未发现异常变化。实验组肝脏切片中细胞排列整齐，肝细胞和细胞核大小均匀，结构显示良好，亦未发现异常变化。这些结果表明，长期饲喂基因工程产品Pc-hepc不会导致黑鲷肝脏、肠道组织形态的异常变化。　　3.长期应用基因工程产品Pc-hepc，无外源基因的扩散转移现象。每隔两周时间随机采集黑鲷各组织样品及养殖土池水样、土壤、植物等环境样本，提取基因组后，用PCR方法特异检测外源的酵母基因及Pc-hepc基因，确定这些基因是否有向黑鲷组织和周围环境的转移和扩散情况。结果显示没有扩增到与阳性对照大小一致的条带，表明在投喂Pc-hepc过程中没有出现外源基因的转移情况，表明长期应用基因工程产品Pc-hepc是安全的。　　4.实验室条件下，发现饲喂不同剂量抗菌肽Pc-hepc对所测定的黑鲷生理生化指标和不同功能基因的表达无显著影响。使用不同剂量(0mg/kg，10mg/kg，100mg/kg，300mg/kg) Pc-hepc饲喂黑鲷，分别检测了几种黑鲷肝脏生理生化指标如ROS、SOD、CAT、GR;几种不同功能基因(如BCL2L1，G6Pase，HNF4α，HLF，MyD88，IκBαA，Histone1)的表达情况。发现饲喂不同剂量抗菌肽Pc-hepc对所测定的几种黑鲷的氧化和抗氧化指标无显著性影响，不会影响黑鲷的糖代谢，也不会引起黑鲷的免疫应激，但有可能表现促凋亡的作用。这些结果也从另一方面证实了使用Pc-hepc的安全性。　　5.发现长期饲喂抗菌肽Pc-hepc对黑鲷肠道菌群无显著影响。利用高通量测序技术研究了长期饲喂抗菌肽Pc-hepc对黑鲷肠道菌群的影响，研究发现变形菌门(Proteobacteria)和厚壁菌门（Firmicutes）是黑鲷肠道细菌中的两个主要门类，长期饲喂抗菌肽Pc-hepc对黑鲷肠道菌群多样性的无显著影响，但是会降低肠道中梭菌纲(Clostridia)的相对丰度，说明长期饲喂抗菌肽Pc-hepc不会引起黑鲷肠道菌群失调，且能在一定程度上抑制肠道有害微生物，从而维持黑鲷肠道的正常代谢和免疫功能。说明饲喂基因工程产品Pc-hepc安全有效，不会引起养殖鱼类肠道菌群的紊乱。　　综上，抗菌肽基因工程产品Pc-hepc可长期安全应用于鱼类养殖业。