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目的:类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的自身免疫性疾病,关节内伴有严重炎症微环境。目前,用于RA治疗的非甾体抗炎药(Non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)存在控制疾病进展效果差、患者依从性差、不良事件频发等缺陷。吲哚美辛(Indomethacin,IND)是一种广泛使用的非甾体抗炎药,因其溶解度差、利用率低而面临各种副作用。因此,开发高效、低毒的新型试剂以提高其临床应用具有重要意义。方法:纳米系统(IND@PB@M@HA)是通过将IND加载到普鲁士蓝纳米粒子(Prussian blue,PB)中并用杂化膜(Hybrid cell membranes,M)伪装及透明质酸(Hyaluronic acid,HA)表面修饰来制备。在细胞水平上:以脂多糖(LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7为炎症模型模拟RA体外炎症环境,采用MTT比色法测定IND@PB@M@HA NPs辅以光热疗法对细胞活力的影响;酶联免疫吸附测定法(ELISA)鉴定IND@PB@M@HA NPs对炎症微环境的抑制作用;倒置荧光显微镜检测细胞内活性氧水平探究其治疗效果。在动物水平上:建立佐剂诱导的大鼠AIA关节炎模型,治疗全程记录体重、足肿程度及关节炎评分;治疗结束后采用小动物活体CT成像系统观察大鼠足部骨侵蚀情况;苏木精-伊红染色法(HE)观察踝关节滑膜增生程度;Bio-Plex悬液芯片技术检测大鼠血清中INF-γ、IL-12P70、IL-1α、IL-2、IL-6、TNF-α、IL-5、IL-1β、GM-CSF细胞因子水平判定IND@PB@M@HA NPs的抗炎效果。结果:1.PB NPs和IND可以联合抗炎:PB NPs和IND均抑制LPS处理的RAW264.7细胞的生长,其半数最大抑制浓度(IC50)值分别为20.81μg/ml和46.24μg/ml,当PB NPs和IND处理类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)时,其IC50值分别为329.3μg/ml和113.5μg/ml。此外,在联合治疗(IND@PB@M@HA NPs浓度为40μg/ml,含6.4μg/ml IND;对照组(IND)浓度为40μg/ml)后,RA-FLS的细胞活力从~68.8%下降到~50.9%,LPS诱导的RAW264.7细胞的活力从~69.6%下降到~39.8%。此外,激光辅助治疗后炎性RAW264.7细胞的活力进一步降低了约10%。2.在IND@PB@M@HA NPs处理LPS诱导的RAW264.7细胞中发现,IND@PB@M@HA NPs具有强效清除ROS能力,与单独的IND相比具有显著性差异(P<0.01)。3.与未经任何处理的LPS诱导的RAW264.7细胞相比,IND@PB@M@HA NPs治疗组可以显着下调IL-6和TNF-α的水平(分别为~11.02 ng/ml vs.~14.20 pg/ml;~51.15 ng/ml vs.~4.72 pg/ml)。4.在动物水平上:与模型组相比,各药物干预的大鼠红肿程度均有明显改善。在这些组中,IND@PB@M@HA NPs组联合光热作用对AIA治疗显示出最强的疗效(P<0.05)。这反映在足部红肿消失、炎症细胞因子浸润减少及骨侵蚀抑制上。结论:1.PB NPs和IND可联合治疗,即通过降低炎症因子的水平以及降低炎性巨噬细胞的活力来产生强大的抗炎作用,且ROS水平大幅降低。2.IND@PB@M@HA NPs辅以光热疗法具有治疗RA潜力。其治疗作用与炎症因子的抑制作用具有内在联系。3.IND@PB@M@HA NPs显着降低了大约10倍的IND使用剂量,并具有优异的生物安全性。4.PB NPs还首次被报道利用其显著的抗炎效果来有效阻碍AIA的疾病进展。