花药培养和染色体有选择的消除技术建立小麦DH群体的研究

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yesw04
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单倍体植株经自然加倍或人工加倍处理可产生基因位点纯合的加倍单倍体(Doubled Haploid)系,并由这些DH系构建成永久性分离群体。这种群体可以直接用于育种实践,更广泛用于分子标记等遗传学研究。小麦DH群体的构建包括单倍体植株的获得和染色体加倍两个主要技术环节。目前,获得小麦单倍体的方法主要有F1代花药培养法和染色体消除法。不管是用花药培养法还是用染色体消除法,都存在两个主要问题,一是获得单倍体植株的效率较低,二是单倍体植株的加倍效率较低。本研究以解决这两个问题为基础,对影响花药培养效率的蔗糖浓度、激素配比、基因型、Cu2+浓度等因素以及影响小麦×玉米单倍体植株获得频率的授粉次数,受体基因型、小麦单倍体胚拯救中的蔗糖浓度等因素进行了详细的研究,对小麦单倍体植株的安全越夏及高效二倍化方法进行了探索,并对DH群体的抗白粉病特性及农艺性状进行了初步考察。现将主要结果报告如下:1.提高小麦花药培养效率的研究对影响小麦花药培养效率的蔗糖浓度、激素配比以及基因型进行了研究。结果表明,蔗糖浓度对小麦花药愈伤组织的诱导有显著影响,最适蔗糖浓度为100g/L;不同激素组合对小麦花药愈伤组织的再分化频率也有影响,供试的3个基因型均以W14附加KT1.5mg/L+ IAA 0.5mg/L激素组合的绿苗分化率最高,分别为59.09%、48%和57.14%,显著高于W14附加另外2个激素组合的绿苗分化率。研究还表明,基因型不同,小麦花药组织的脱分化特性和再分化特性不同;同一基因型小麦花药愈伤组织的诱导和再分化之间存在显著的正相关。2.Cu2+对小麦花药培养特性的影响首次在小麦花药离体培养中研究了不同Cu2+浓度对花药组织脱分化和再分化特性的影响。结果表明,诱导培养基中的Cu2+对小麦花药愈伤组织的诱导及再分化的影响表现为低浓度下的促进作用和高浓度下的抑制作用,最适Cu2+浓度为0.15μmol/L。在该浓度下,3个供试材料的出愈率分别比对照组提高了239.14%、214.72%和80%,反应率分别比对照组提高了156.70%、151.86%和65.96%,绿苗分化率分别比对照提高了200.05%、241.87%和333.49%。分化培养基中的Cu2+对小麦花药愈伤组织的再分化有明显的负向效应,3个供试材料中,均以不附加Cu2+的对照的绿苗分化率最高,分别为70%、66.67%和39.29%,附加不同浓度的Cu2+后,绿苗分化率显著下降。3.影响小麦×玉米单倍体胚获得频率的因素及胚拯救
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